李冬
- 作品数：4 被引量：35H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹参素对肝星状细胞RhoA/RockⅠ信号通路的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:观察丹参素对肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSC)RhoA/RockⅠ信号通路的影响。方法:体外分离、培养大鼠肝HSC,以RockⅠ特异性抑制剂Y-27632 30μmol/L、0.062 5～0.25 mmol/L丹参素分别与纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)刺激的HSC共同孵育。四甲基偶氮唑盐法测定HSC增殖,酶联免疫吸附试验测定Ⅰ型胶原分泌,Western blot测定RhoA,p-Mlc(Thr18/Ser19)p,-FAK(Tyr397)蛋白表达。结果:FN作用24h能刺激HSC增殖,Ⅰ型胶原分泌,且上调了RhoAp、-Mlc(Thr18/Ser19)蛋白,p-FAK(Tyr397)蛋白的表达;丹参素和RockⅠ特异性抑制剂Y-27632均能明显抑制上述效应。结论:FN刺激活化了HSC的RhoA/RockⅠ信号通路、整合素信号通路;丹参素抑制HSC增殖,胶原分泌的作用与阻断RhoA/RockⅠ信号通路有关;RhoA/RockⅠ信号通路阻断后对整合素信号通路关键酶FAK下调效应为丹参素经RhoA/RockⅠ信号通路抗纤维化的分子机制之一。
- 姜中华戴立里余冰冰李冬
- 关键词：丹参素肝星状细胞肌球蛋白轻链
- 丹参素对大鼠肝星状细胞氨基末端蛋白激酶信号转导的影响被引量：4
- 2009年
- 目的探讨丹参素抗肝纤维化作用的机制。方法分离大鼠原代肝星状细胞（HSC），用0．0312、0．0625、0．1250、0．2500、0．5000、1．0000mmol／L不同浓度丹参素作用于HSC，四甲基偶氮唑盐法检测丹参素对HSC生长增殖的抑制作用；应用免疫细胞化学法观察Ⅰ型胶原合成，酶联免疫吸附法观察Ⅰ型胶原分泌。Westernblot法观察丹参素对白细胞介素-1β（IL-1β）刺激的HSC内氨基末端蛋白激酶（JNK）蛋白及其磷酸化表达的影响。采用随机设计的方差分析，SNK-q进行统计学处理。结果与0mmol／L组比较，丹参素其他浓度组明显抑制了HSC增殖，并呈剂量依赖性。丹参素（0．0625～0．2500retool／L）对IL-1β引起的HSC增殖具有明显的抑制作用，并呈剂量依赖性。0．25mmol／L丹参素对正常培养的和经IL-1β刺激的HSC作用24h能下调Ⅰ型胶原的合成和分泌。IL-1β能刺激HSC中P-JNK的明显表达，丹参素能下调IL-1β诱导的HSC中P-JNK的表达，但其对JNK表达水平没有明显影响。结论丹参素可抑制正常传代培养的和经IL-1β刺激的大鼠HSC增殖、Ⅰ型胶原合成与分泌，其机制可能与抑制JNK信号转导通路有关。
- 余斌斌戴立里李欣李冬姜中华
- 关键词：肝纤维化肝星状细胞信号转导白细胞介素-1丹参素
- 丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK、NF-κB信号通道的影响被引量：8
- 2009年
- 目的观察丹参素对活化的大鼠肝星状细胞(HSC)氨基末端蛋白激酶(JNK)以及NF-κBP65表达的影响,探讨其抗肝纤维化作用的机制。方法分离大鼠原代HSC,MTT法检测丹参素对细胞的生长抑制,免疫细胞化学法观察Ⅲ型胶原合成,ELISA法观察Ⅲ型胶原分泌。AO/EB荧光染色观察HSC凋亡形态学变化,Annexin-V-FITC/PI联合流式细胞仪检测HSC的凋亡率,Western blotting观察丹参素对IL-1β刺激的HSCs内P-IκBα、NF-κBP65和JNK蛋白的表达。结果和结论丹参素可抑制活化的HSC增殖,降低胶原合成和分泌,促进HSC凋亡,并抑制IL-1β刺激的HSC中JNK的磷酸化及NF-κBp65的表达。
- 吴宗辉戴立里余斌斌李冬
- 关键词：丹参素肝星状细胞白细胞介素-1Β核转录因子-ΚB
- 丹参素对大鼠肝星状细胞增殖、凋亡及NF-κB活性的影响被引量：20
- 2009年
- 目的观察丹参素对IL-1β刺激的肝星状细胞增殖、凋亡及NF-κB活性的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制。方法用原位-密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSCs),以不同浓度的丹参素作用于IL-1β刺激的HSCs,MTT法、AO/EB免疫荧光和Annexin V-FITC/PI分别检测HSCs的增殖和凋亡;免疫细胞化学、ELISA法、Western blot分别检测Ⅲ型胶原的生成、NF-κB核转位及细胞质p-IκBα、细胞核NF-κB p65的表达。结果与对照组相比,IL-1β刺激组HSCs增殖明显增加(P<0.01),凋亡率明显减低(P<0.05),Ⅲ型胶原的合成和分泌明显增加(P<0.01);不同浓度丹参素作用24 h后HSCs增殖明显减低(P<0.01),凋亡明显增加(P<0.01),以早期凋亡为主,Ⅲ型胶原的合成和分泌亦明显减少(P<0.05,P<0.01);Western blot结果显示IL-1β作用30 min时细胞质p-IκBα、细胞核NF-κB p65蛋白表达明显增加(P<0.01),出现核转位;免疫细胞化学显示细胞核内p65阳性染色细胞增多浓染,提示IL-1β可以诱导HSCs的NF-κB活性;丹参素组细胞质p-IκBα、细胞核NF-κB p65蛋白表达明显减低(P<0.05,P<0.01),核转位减少,细胞核内p65阳性染色细胞数减少淡染,提示丹参素可以抑制IL-1β诱导的HSCs NF-κB活性。结论丹参素抑制IL-1β诱导的HSCs增殖,促使HSCs凋亡,减少Ⅲ型胶原的合成和分泌,其机制可能与抑制NF-κB活性有关。
- 李冬戴立里余斌斌姜中华
- 关键词：丹参素增殖凋亡NF-ΚBIL-1B
