张永玲
- 作品数:7 被引量:5H指数:1
- 供职机构:南京医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人肝癌细胞株SMMC-7721中转醛醇酶活性的变化与磷酸化关系的研究
- 目的:研究人肝癌细胞株SMMC-7721中转醛醇酶(Transaldolase,TAL)活性变化与磷酸化的关系。方法:(1)采用血清饥饿法将细胞同步化于G0期,分别给予不同血清浓度(10%,1%),提取培养1、2、4、8...
- 张永玲邓银芬戴岭施景耿洁陆智旻徐婉莹德伟
- 关键词:磷酸化翻译后修饰
- 大鼠不同发育阶段胰腺Wnt5a的表达被引量:1
- 2008年
- 目的:探讨大鼠胰腺不同发育阶段与胰岛形成和功能完善相关基因的表达趋势。方法:分离孕12.5 d(E12.5)、E15.5 d(E15. 5)、18.5 d(E18.5),新生(P0),生后14天(P14)、21 d(P21)及成年(AP)大鼠胰腺组织,采用高密度寡核苷酸芯片对E12.5、E 15.5、E18.5、P0和AP胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR验证wnt5a在不同发育时期的表达。结果:与胰岛功能相关基因多从胚胎18.5 d开始出现明显高表达;与细胞迁移、聚集黏附相关基因多在胚胎18.5 d高表达;WNT信号通路相关基因在胚胎15.5 d表达量最高,wnt5a在胚胎15.5 d表达量达到高峰。结论:wnt5a可能与胰岛形成、功能完善及出生后的胰腺重塑有关。
- 蔺扬波侯良芹郭静张永玲石慧曹丽华王银河德伟
- 关键词:WNT5A胰岛发育
- NBC1在大鼠生后胰腺发育中的表达被引量:1
- 2008年
- 目的:研究碳酸氢钠协同转运载体(NBC1)在大鼠生后胰腺发育过程中的表达变化及细胞定位。方法:采用RT-PCR和western blot分别检测了NBC1核酸和蛋白在新生(P0)、P7、P14、P21和成年时期胰腺的表达情况,用Double fluorescence im- munohistochemistry分析了NBC1在P7、P14和成年时期腺泡和β细胞的定位表达。结果:在大鼠胰腺生后发育过程中,NBC1核酸、蛋白在P14时特异高表达,而在P7和成年最低;在腺泡基底侧膜和β细胞膜有阳性信号,且在成年胰腺中β细胞膜阳性信号较腺泡基底侧膜强。结论:NBC1在生后发育重塑旺盛期特异高表达,而在凋亡旺盛期和成年期表达最低。与腺泡细胞相比在成年期NBC1更集中于β细胞。提示NBC1在胰腺生后发育过程中不仅与胰岛结构重塑而且与胰腺功能发挥相关。
- 曹丽华石慧候良芹郭静张永玲蔺扬波袁栎德伟
- 关键词:免疫定位
- hCG对小鼠间充质细胞(K9)转醛醇酶活性的调节被引量:2
- 2006年
- 目的:研究小鼠间充质细胞(K9)中人绒毛膜促性腺激素(hCG)对转醛醇酶(TAL)活性的调节.方法:K9细胞培养,加hCG,cAMP孵化,测定TAL活性、Westernblot检测TAL蛋白表达、Northernblot检测TALmRNA表达、2DWesternblot测定TAL蛋白迁移表达.结果:①hCG促使TALmRNA表达升高.2,4,8和16hTALmRNA表达密度的扫描结果依次为:hCG组(32.7±2.3),(62.2±3.5),(27.5±2.9)和(18.1±1.1),对照组(32.3±2.7),(25.2±1.9),(31.4±3.3)和(22.5±2.6),其中4h组间差异显著(P<0.01),8及16h表达显著下降;②hCG对TAL蛋白表达无显著差异;③hCG和cAMP促使TAL活性升高,hCG组2,4,8,16和20h的TAL活性依次为(417±33),(438±47),(508±24),(576±18)和(593±29)nkat/g,均高于同期对照组(288±18),(302±20),(334±24),(393±14)和(399±10)nkat/g,组间差异显著(P<0.05);④2DWesternblot:hCG导致TAL第二亚型出现新的蛋白迁移点b6,并向酸性端迁移.结论:hCG促使小鼠K9细胞TAL的转录及活性升高,但hCG对TAL活性调节与转录水平无关,提示TAL活性调节发生在翻译后修饰,可能是通过第二信使cAMP促进了TAL磷酸化过程.
- 袁俐张永玲袁栎张一鸣缪珩德伟
- 关键词:转醛醇酶人绒毛膜促性腺激素
- 人肝癌细胞株SMMC-7721中转醛醇酶活性变化与磷酸化关系的研究
- 转醛醇酶是磷酸戊糖途径非氧化阶段的关键酶,其主要作用在于调控磷酸戊糖途径产生5-磷酸核糖和尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,前者是细胞增殖过程中合成核苷酸不可缺少的原料;后者是生物体内重要的还原当量,不仅维持谷光甘肽处于还原状...
- 张永玲
- 关键词:肝癌癌细胞株核苷酸细胞增殖
- 文献传递
- 磷酸化对人肝癌细胞株SMMC-7721转醛醇酶活性的影响
- 2008年
- 目的:研究人肝癌细胞株SMMC-7721中转醛醇酶(Transaldolase,TAL)活性变化与磷酸化的关系。方法:SMMC-7721细胞培养,细胞周期同步化后分组加不同浓度(10%、1%)胎牛血清孵育,分别测定不同孵育时间(1、2、4、8h)TAL酶活性;Western blot检测TAL蛋白表达水平。磷酸酶消化法检测TAL活性变化与磷酸化的关系。结果:①人肝癌细胞株SMMC-7721中TAL活性在10%胎牛血清培养时明显高于1%胎牛血清,2、4、8h显著性差异(P<0.05)。②不同浓度(10%.1%)胎牛血清孵育2、4、8hTAL蛋白表达水平无显著性差异。③磷酸化消化后TAL活性,与消化前相比呈显著性下降。结论:人肝癌细胞株SMMC-7721中增加血清浓度明显提高TAL活性,酶活性变化与TAL蛋白表达水平无关,提示活性调节发生在蛋白翻译后修饰,其中磷酸化起重要作用。
- 张永玲郭静张一鸣德伟
- 关键词:翻译后修饰
- 大鼠胰腺不同发育时期胰岛素分泌相关基因的表达被引量:1
- 2007年
- 目的探讨与胰岛素分泌相关基因在大鼠发育不同阶段的表达趋势。方法采用高密度寡核苷酸芯片和RT-PCR技术对孕12.5d(E12.5)、E15.5d(E15.5)、E18.5d(E18.5)初生和成年大鼠胰腺进行基因转录水平分析。结果在大鼠发育不同阶段胰岛素mRNA持续表达;调控胰岛素基因表达的相关转录因子多在E12.5或E15.5开始表达(分别占60%和20%);与胰岛素分泌相关的基因多在胚胎发育中后期开始表达(占66.7%),其中基因Rim1在胰腺发育不同时期呈现差异表达,于初生期达到表达高峰。结论胚胎发育中后期是胰腺内分泌部发育的关键阶段。
- 郭静袁庆新刘莉洁滕丽萍张永玲程梅蔺扬波德伟
- 关键词:胰岛素分泌胰腺发育