闫鹏飞
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 自我延伸过程对木聚糖酶-CBM融合基因的影响
- 2013年
- 探讨了木聚糖酶-纤维素结构结合结构域(CBM)基因融合过程,在不加引物而只用两种DNA片段经PCR扩增全长融合基因,从而证明了自我延伸过程的存在,是指互补匹配的两段DNA互为引物、互为模板在聚合酶作用下合成融合基因的过程,从理论上阐明了PCR中的自我延伸过程。在传统PCR中加入3次循环的自我延伸程序(94℃×1 min,52℃×1 min,72℃×1 min),融合基因扩增量要更多。进而探讨自我延伸程序中延伸时间的影响,发现延伸时间2、3、5 min扩增的融合基因量显著增强;而延伸时间为1 min时,融合基因条带的亮度增加不明显,说明延伸时间是增加扩增量的关键因素。
- 闫鹏飞马闪闪赵黎胡瑜刘亮伟
- 关键词：融合PCR融合基因
- F/10木聚糖酶二级结构含量对热稳定性的影响被引量：5
- 2013年
- 从PDB库中收集F/10家族12个木聚糖酶晶体结构,查找对应酶最适温度并作为热稳定性指标,分析了二级结构含量与稳定性的关系.结果表明,稳定性与α-螺旋含量明显正相关(相关系数为3.1);与β-折叠片含量负相关,但是相关性很小(相关系数0.2);与无规则片断含量明显负相关(相关系数为-2.2).说明二级结构含量影响酶稳定性,这个结果与(β/α)8结构相吻合,螺旋位于酶分子外周,构成分子骨架;折叠片位于分子中间,构成活性中心区域;无规则片断将螺旋和折叠片连接在一起.这一结果明确解释了前人分子改造结果:螺旋中相关氨基酸突变可以提高酶稳定性,指明了酶分子稳定性改造方向,即:减少结构中无规则片断含量、增加螺旋含量可以提高稳定性.
- 叶延欣闫鹏飞胡渝刘亮伟
- 关键词：木聚糖酶热稳定性
