刘迎节
- 作品数：12 被引量：62H指数：4
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 动态力学加载下MC3T3-E1细胞在3D打印三维仿生复合支架上的成骨效应研究
- 2018年
- 目的观察动态力学加载对低温3D打印联合冷冻干燥法制备的三维仿生复合支架材料内MC3T3-E1细胞增殖、分化、成骨特异性基因表达的影响。方法将丝素蛋白、Ⅰ型胶原、羟基磷灰石按质量比3∶9∶2混合后,采用低温3D打印联合冷冻干燥技术制备三维仿生复合支架;大体观察支架外形,Micro-CT观察支架孔径及孔隙率,测定吸水膨胀率以及应力、应变、弹性模量。取MC3T3-E1细胞接种至三维仿生复合支架,随机分成两组:实验组培养期间行动态力学加载,每天1次、每次15 min、频率1 Hz、应变3 500με;对照组不作力学加载。培养7、14 d,分别对细胞-支架复合物行HE染色及扫描电镜观察细胞在支架上生长情况;Western blot以及实时荧光定量PCR检测Ⅰ型胶原、BMP-2、骨钙素(osteocalcin,OCN)蛋白及m RNA表达。结果制备的三维仿生复合支架为白色立方体网格,Micro-CT检测见支架材料内部呈孔隙网状结构,孔隙连通性良好;大孔径直径为(506.37±18.63)μm,微孔径直径为(62.14±17.35)μm,孔隙率为97.70%±1.37%,吸水膨胀率为1 341.97%±64.41%。力学测试示,支架压缩至10%时,支架压缩位移为(0.376±0.004)mm、压缩应力为(0.016±0.002)MPa、弹性模量为(162.418±18.754)k Pa。复合培养7、14 d,两组HE染色及扫描电镜均见细胞在支架内部生长,主要分布在支架孔壁周围,其中实验组细胞较对照组增多,且细胞由梭形变为扁平状。除200倍镜下14 d时两组细胞计数差异无统计学意义(t=–2.024,P=0.080)外,其余不同放大倍数(40、100、400倍)下各时间点实验组细胞数均显著高于对照组(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测示:实验组培养7、14 d时Ⅰ型胶原、OCN m RNA相对表达量显著高于对照组(P<0.05),但BMP-2 m RNA相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot检测示,实验组培养7、14 d时Ⅰ型胶原、BMP-2、OCN蛋白相对表达量均显著高于对照组(P<0.
- 宋秀钢李晖李瑞欣袁清献刘迎节程威张西正
- 关键词：丝素蛋白胶原羟基磷灰石MC3T3-E1细胞
- 淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞凋亡和骨架的影响被引量：4
- 2017年
- 目的研究淫羊藿苷对过载损伤后成骨细胞的凋亡和细胞骨架的影响。方法应用4点弯曲加载装置模拟过载损伤力学环境,建立过载损伤模型,依据力学加载前后是否加入药物干预,实验分为空白对照组、单纯给药组、单纯损伤组、预防给药组和损伤治疗组。应用细胞流式术进行细胞凋亡检测。应用特异性荧光染料分别标记微丝蛋白和细胞核,在激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架的变化。结果与对照组比,过载损伤组的凋亡率最高,单纯给药组最低(P<0.05);在过载处理组中,与单纯过载损伤组比,预防给药组的凋亡率最低(P<0.05)。单纯过载损伤组的细胞皱缩变形,微丝排列紊乱,骨架排列疏松,轮廓模糊,骨架甚至出现破碎等现象。预防给药组细胞骨架形态变化不大,细胞核未见明显变化。结论淫羊藿苷可以在一定程度上抑制过载损伤后成骨细胞的凋亡,维持细胞骨架稳定。
- 刘迎节侍才洪陈凡平郝宝辉李昊李军徐云强李瑞欣张西正
- 关键词：过载成骨细胞淫羊藿苷凋亡细胞骨架
- 力学调控长链非编码RNA对间充质干细胞成骨分化作用的研究进展
- 2020年
- 随着第3代高通量测序技术和组织工程的发展,近年来研究发现,许多长链非编码RNA(long-chain noncoding RNAs,LncRNAs)在力学调节间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的成骨分化中起重要作用。力学因素调控相关的LncRNAs,然后LncRNAs通过转录、转录后以及表观遗传等多层次发挥调节作用,进一步调控骨相关细胞功能。LncRNAs也可能作为力学响应分子参与MSCs成骨分化、骨重建以及骨骼系统疾病的病理过程。
- 程威林祥龙张扬刘洋朱双龙朱双龙刘迎节徐云强徐云强
- 关键词：长链非编码RNA骨髓间充质干细胞成骨分化
- 力学过载对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响及其作用机制的研究
- (引言)骨组织在整个生命过程中不断地受到各种力的作用而相应地调节其质量、密度和内部结构.骨在生理载荷作用下成骨和破骨保持动态平衡;而在失重、高加速度(高G)、过载等极端力学作用下，成骨和破骨平衡遭到破坏.研究力学过载刺激...
- 刘迎节李瑞欣徐云强宋秀钢张西正
- 关键词：成骨细胞细胞应答
- 高重力对成骨细胞增殖与凋亡的影响
- 2017年
- 【目的】了解力学因素在骨组织重建过程中的作用,探讨高重力对成骨细胞(MC3T3-E1)增殖与凋亡的影响,为组织工程中研究高重力对骨组织重建的影响提供理论依据。【方法】将培养的MC3T3-E1细胞按高重力加载力不同分为对照组、5 G组、10 G组、15 G组、20 G组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除G值外相同的环境中。【结果】MTT法检测显示,5 G组增殖显著增高,10 G组增殖无显著差异,15 G和20 G组增殖均显著降低。流式细胞术检测显示,5 G组凋亡率显著低于对照组,10 G、15 G、20 G组凋亡率都显著增高。凋亡相关指标:Bax基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G、15 G组表达无显著差异,20 G组表达显著上调。Bcl2基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组表达显著上调,15 G、20 G组表达无显著差异。Bax/Bcl2基因表达比,与对照组比较,5 G组显著下调,10 G、15 G组无显著差异,20 G组显著上调。P53基因,与对照组比较,5 G组表达显著下调,10 G组无显著差异,15 G、20 G组表达都显著上调。【结论】成骨细胞对高重力刺激的响应可能存在一个"临界点","临界点"以下的高重力刺激可促进细胞增殖,抑制细胞凋亡;"临界点"以上的高重力刺激可抑制细胞增殖,并激活细胞凋亡。
- 李军孙明林张春秋宋光明李瑞欣张西正黄揆刘迎节
- 关键词：成骨细胞生物力学增殖凋亡
- 力学过载对成骨细胞损伤及中药修复的研究进展被引量：1
- 2016年
- 骨的生长代谢由成骨细胞的成骨及破骨细胞的吸收共同控制,而成骨细胞在成骨过程中起主要作用。过载影响成骨细胞的增殖与分化,其加载方式、强度、持续时间等因素都可改变成骨细胞的生物特性,进而影响成骨细胞的功能活性。而过载引起成骨细胞应答的机制还处于探索阶段,需要进一步深入研究。大量实验证明,中药淫羊藿苷促进成骨细胞增殖及分化,一定浓度的淫羊藿苷对骨损伤修复起重要作用。综述骨细胞对过载刺激后的反应及淫羊藿苷对成骨细胞的损伤修复。
- 刘迎节李瑞欣赵滨李昊李军苏卫华郝宝辉徐云强张西正
- 关键词：过载成骨细胞细胞应答淫羊藿苷
- 柴胡皂苷a影响大鼠急性脊髓损伤后机体炎症水平表达的实验研究被引量：14
- 2017年
- 目的:探讨不同浓度柴胡皂苷a对大鼠急性脊髓损伤早期组织和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达水平的影响。方法:选用健康成年SD大鼠30只,随机分为假手术组、单纯损伤组、柴胡皂苷a 5 mg/kg组、10 mg/kg组、20 mg/kg组共5组。利用改良Allen’s重物打击法制作急性脊髓损伤模型。单纯损伤组注入生理盐水,药物组通过腹腔注射。所有动物分组于术后24 h处死,以损伤段为中心上下取脊髓10 mm和大鼠腔静脉血清2 m L,采用ELISA法检测各组大鼠脊髓组织和血清中TNF-α和IL-6表达水平。结果:(1)单纯损伤组大鼠脊髓组织和血清中TNF-α和IL-6水平均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)柴胡皂苷a 5 mg/kg组、10 mg/kg组、20 mg/kg组大鼠脊髓组织和血清中TNF-α和IL-6水平均低于单纯损伤组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)柴胡皂苷a 10 mg/kg组、20 mg/kg组大鼠脊髓组织中TNF-α和IL-6表达水平低于5 mg/kg组,差异有统计学意义(P<0.05),10 mg/kg组与20 mg/kg组差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠血清中TNF-α和IL-6表达水平柴胡皂苷a 20 mg/kg组低于5 mg/kg组,差异有统计学意义(P<0.05),10 mg/kg组与20 mg/kg组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:柴胡皂苷a通过影响急性脊髓损伤早期炎症因子的表达减轻继发性免疫炎症反应,从而改善机体免疫功能;10mg/kg组效果优于其他实验组,且该药物可能部分通过脊血屏障。
- 朱双龙陈旭义段会全刘迎节孙中磊徐云强
- 关键词：急性脊髓损伤柴胡皂苷A肿瘤坏死因子Α白介素6
- 力学过载与淫羊藿苷耦合作用对成骨细增殖、分化的影响
- 目的： 骨的生长代谢是由成骨细胞（成骨）和破骨细胞（吸收）共调控发挥作用，其中，成骨细胞在骨形成的过程中起着主导决定作用。力学环境是影响骨重建的重要因素，成骨细胞是骨响应力学刺激的重要效应细胞。力学刺激影响成骨细胞的增...
- 刘迎节
- 关键词：淫羊藿苷骨损伤成骨细胞细胞分化
- 胶原/丝素蛋白神经导管修复周围神经缺损的研究与应用进展被引量：10
- 2016年
- 背景:周围神经缺损引起的肢体功能障碍始终是医学界面临的难题。针对修复周围神经缺损的组织工程支架仍处在研究阶段,理想的构建材料和制作工艺仍处于在探索研究中。目的:综述胶原/丝素蛋白神经导管修复周围神经缺损的研究进展。方法:由第一作者检索2003至2016年Pub Med数据库和中国知网数据库相关人工神经支架构建方法和原材料选择研究的文献,并进行总结、整理和论述。结果与结论:共纳入46篇文献。胶原蛋白具有较高的生物相容性及可降解性,自身及其降解产物在宿主内不会发生炎症反应等优点,但同时也存在生物降解速度快及物理性能差等缺点。丝素蛋白拥有较高的柔韧性和生物相容性,但其体内降解速度较缓慢。在支架制作工艺上,快速成型三维打印法可精准控制支架的孔径及其分布,孔隙结构高度整齐,可打印各种形状的支架,时间短,能够进行规模化生产。将胶原/丝素蛋白用三维打印法制备成神经支架,可保持良好生物相容性,也改善了力学性能。当今,国内外对胶原蛋白或丝素蛋白等天然生物高分子材料在神经损伤修复方面做了大量研究,同时在支架制作工艺上也不断改进,因此,胶原/丝素蛋白作为原材料并联合三维打印制作工艺有望成为未来周围神经缺损修复的主要选择方式。
- 徐云强刘迎节李瑞欣朱双龙张振辉
- 关键词：生物相容性材料丝素蛋白神经支架冷冻干燥法
- 成骨细胞MC3T3-E1对高重力的力学生物学响应被引量：4
- 2017年
- 目的探讨高重力对前成骨细胞MC3T3-E1形态和成骨功能的影响。方法将MC3T3-E1细胞按不同高重力分为对照组、5 g组、10 g组、15 g组、20 g组,实验组每次加载30 min连续加载3 d,对照组同步置于除g值外相同的环境中。鬼笔环肽染色考察细胞骨架蛋白形态;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测ALP含量;实时定量PCR检测ALP、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,ColⅠ)、骨钙素(osteocalcin,OC)、runt相关转录因子(runt-related transcription factors,Runx2)的基因表达;Western blotting检测ColⅠ、OC蛋白表达。结果高重力条件下成骨细胞胞体变薄,细胞表面积明显增大;细胞骨架排列结构变得疏松、松散,微丝肌动蛋白束状结构减少,微丝呈弥散状,有序性降低。成骨分化相关指标ALP、ColⅠ、OC、Runx2的基因均显著上调;ColⅠ和OC蛋白亦呈现高表达。对照组茜素红染色只有极少量面积很小的桔红色结节,高重力加载后各组细胞明显形成面积大小不一的桔红色结节。结论高重力下成骨细胞可通过骨架结构发生重排引起细胞形态的改变,并进一步通过上调分化相关基因和蛋白表达,有效刺激成骨细胞成熟分化。
- 李军孙明林宋光明张春秋李瑞欣张西正黃揆刘迎节
- 关键词：成骨细胞生物力学骨向分化
