段芳芳
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
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- 自发性乳腺肿瘤C3H/HeJNju小鼠原发肿瘤组织与脾脏间CD4~+CD25~+Treg TCR β CDR3组库异质性分析
- 目的:采用Illumina Solexa 高通量测序技术,分析自发性乳腺肿瘤C3H/HeJNju小鼠原发乳腺肿瘤组织与脾脏间CD4+CD25+Treg TCRβCDR3组库的同质性与异质性,探讨肿瘤组织与和全身免疫循环之...
- 段芳芳
- 文献传递
- 乳腺癌患者化疗前后外周血B细胞BCR H-CDR3受体库动态变化特征被引量:1
- 2018年
- 本文利用高通量测序(high-throughput sequencing,HTS)技术对早期乳腺癌患者化疗前后,随着WBC总数及淋巴细胞的变化对外周血B细胞BCR H-CDR3受体库进行分析,探讨化疗对其的影响。分别采集和分离3例进行TAC化疗的乳腺癌患者在化疗前、中、后的PBMC,提取其总DNA并采用多重PCR建库和制备BCR H-CDR3受体库后Illumina检测CDR3序列并分析。结果发现:1.TAC化疗前患者WBC、淋巴细胞绝对值均正常,而化疗中、后WBC、淋巴细胞绝对值虽仍正常,但较化疗前下降;2.P2化疗中较化疗前受体库多样性有所下降,化疗后较化疗中稍升高,但仍明显低于化疗前;P1、P3化疗中多样性都比化疗前高;化疗后,P1较化疗中降低,但高于化疗前,而P3化疗后较化疗中明显升高;3.3例患者化疗后出现不同程度IGHV取用丢失。由此提示:1.化疗后随着WBC、淋巴细胞绝对值的下降,P2乳腺癌患者在化疗中及化疗后受体库的多样性在整体水平上较化疗前有所下降,考虑是TAC对受体库的多样性造成损伤;而P1、P3化疗中与化疗后B细胞受体库多样性整体上都较化疗前高,可能是机体对化疗药物产生的应激反应不一致,TAC杀伤了高频克隆的B细胞,间接增加了CDR3受体库的多样性;2.3例早期乳腺癌患者化疗后出现不同程度IGHV取用丢失,提示化疗可能对B细胞IGHV表达和取用产生了一定的影响,并且IGHV-IGHJ家族取用和配对在不同时间点存在优势配对(>0.03)现象,可能与乳腺癌相关抗原诱导有关;3.HTS检测化疗前后B细胞H-CDR3受体库变化可为揭示化疗对患者B细胞应答的影响及B细胞的免疫状态提供辅助。
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- 关键词:高通量测序技术乳腺癌化疗BCR
- 早期乳腺癌患者化疗前后外周血T细胞TCRβ CDR3组库动态变化特征被引量:3
- 2018年
- 该文采用高通量测序(high-throughput sequencing,HTS)技术分析早期乳腺癌患者化疗前后外周血T细胞TCRβCDR3(T-cell receptor beta chain complementarity determining region 3)组库的组成及动态变化特征,初步探讨化疗对T细胞的可能影响及化疗前后患者T细胞的应答功能状态。以病理活检确诊为T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象,选取进行6期TAC[多西他赛(docetaxel,T)、吡柔比星(pirarubicin,A)、环磷酰胺(cyclophosphamide,C)]化疗方案。化疗的3例志愿患者(P1、P2、P3)分别于化疗前、第3期化疗后、第6期化疗后采集外周血分选出单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),提取其总DNA;利用多重PCR建立TCRβCDR3组库进行HTS;采用Immuno SEQ和IMGT-High-V-quest系统对TCRβCDR3序列进行组成和特征分析。结果表明:(1)P1、P2、P3在第3期化疗后的CDR3组库多样性[用反辛普森指数(1/DS)表示]相比化疗前均升高;第6期化疗后,P1和P3相比第3期化疗后CDR3组库多样性降低,但P2相比第3期化疗后CDR3组库多样性升高;(2)P1和P3在第3期化疗后CDR3组库高频克隆(大于1%)较化疗前出现降低,而第6期化疗后CDR3组库高频克隆相比第3期化疗后明显升高;P2第3期化疗后和化疗前相比CDR3组库高频克隆无变化,但第6期化疗后明显降低;(3)P1和P2化疗前后出现部分TRBV基因取用丢失与重新取用,P3的TRBV基因取用未发生明显改变;P2和P3化疗后部分TRBV与TRBJ优势配对消失。早期乳腺癌患者TAC化疗的前、中、后期,其外周血T细胞TCRβCDR3组库表现出个体化的多样性和特征性改变,可能与TAC对个体T细胞的抑制或杀伤相关。监测CDR3组库的组成及动态变化可为化疗对T细胞的影响及化疗前后"个体化"的T细胞免疫状态评估提供基础。
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- 关键词:高通量测序技术乳腺癌化疗
- 非专职淋巴组织部位T细胞亚群研究进展被引量:4
- 2016年
- 近年来随着免疫学基础研究和临床多学科合作的进展,以及细胞、分子研究领域多项技术的革新,越来越多的临床研究和基础实验结果发现,在肝脏、肺脏、小肠组织、扁桃体、皮肤、肿瘤部位等非专职淋巴组织中存在着独特的T细胞亚群和相关分子,其来源、分化、克隆/寡克隆增殖等生物学特性同机体"专职免疫组织/器官"的全身循环免疫系统之间,既有着显著的区别,又保持一定的联系。"
- 段芳芳张滕姚新生
- 关键词:细胞亚群淋巴组织小肠组织机体免疫应答