刘欢
- 作品数：13 被引量：15H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组猪瘟C株E2蛋白全长感染性克隆的构建及分析
- 介绍:猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)和猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)都是临床上严重威胁养猪业的一种严...
- 高飞姜一峰虞凌雪李丽薇杨莘张玉娇刘欢周艳君童光志
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白与天然免疫限制因子SAMHD1相互作用的分析与鉴定
- <正>猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)仍然是世界范围内养猪业的防控重点,并且其仍在持续的进化。特别是高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV),对我国的养猪业构成了巨大的威胁。PRRSV难以控制的原因之一在于...
- 杨莘姜一峰虞凌雪高飞李丽薇刘欢黄勤峰周艳君童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒蛋白复合体
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白磷酸化位点鉴定及其作用研究被引量：1
- 2017年
- 为了探索猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白磷酸化对于病毒复制和转录的影响,本研究利用Phos-tag和点突变技术实现了N蛋白磷酸化形式的分离并鉴定出磷酸化位点为第120位丝氨酸(Ser120)。通过反向遗传操作系统将N蛋白的磷酸化位点突变并拯救出病毒。空斑实验、IFA检测、病毒生长曲线结果显示,磷酸化位点突变对于病毒的感染性和N蛋白的核定位没有影响,但是病毒的复制能力减弱。进一步利用荧光定量RT-PCR方法检测突变病毒与亲本病毒在不同感染时间的基因组RNA和亚基因组RNA的转录水平,结果表明突变病毒的g RNA和长链sg RNAs转录水平明显低于亲本病毒,表明N蛋白Ser120磷酸化可能参与了病毒的转录调控过程。
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- 关键词：PRRSVN蛋白磷酸化转录调控
- 猪星状病毒分离及其全基因组序列分析
- 星状病毒(Astrovirus,AstV)是一类可感染人、猪、牛、鸡等30多种哺乳类和禽类动物的RNA病毒,目前的报道发现该病毒主要引起幼年动物肠道相关疾病.与人星状病毒相比,由于缺乏成熟的病毒分离方法,目前仅有少数研究...
- 刘欢黄伟坚杨莘夏天奇覃艳然李勋杰李法凯童光志
- 关键词：全基因组序列
- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组猪瘟C株E2蛋白全长感染性克隆的构建及分析
- 目的：猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)和猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)都是临床上严重威胁养猪业的一种严...
- 高飞姜一峰虞凌雪李丽薇杨莘张玉娇刘欢周艳君童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒猪瘟病毒E2蛋白基因重组
- 文献传递
- 猪星状病毒分离及其全基因组序列分析
- 引言:星状病毒(Astrovirus,AstV)是一类可感染人、猪、牛、鸡等30多种哺乳类和禽类动物的RNA病毒,目前的报道发现该病毒主要引起幼年动物肠道相关疾病。与人星状病毒相比,由于缺乏成熟的病毒分离方法,目前仅有少...
- 刘欢黄伟坚杨莘夏天奇覃艳然李勋杰李法凯童光志
- 猪Delta冠状病毒N蛋白的表达及单克隆抗体的制备
- 猪Delta冠状病毒(Porcine Delta Coronavirus,PDCoV)是一种能够引起仔猪腹泻的新型冠状病毒,2014年该病毒在美国的猪群中爆发并造成普遍流行,给健康养猪带来了严重的威胁.由于PDCoV是近...
- 张文超虞凌雪李慧春陈鹏飞杨德强李先斌刘欢姜一峰杨莘高飞黄勤峰童光志周艳君
- 关键词：N蛋白单克隆抗体
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体的制备被引量：7
- 2017年
- 本研究将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)HuN4株的N基因克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中,经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达了重组His-N蛋白,蛋白分子量为14 kDa,能被PRRSV阳性血清特异性识别。经超声裂解和SDS-PAGE检测后,重组蛋白主要以可溶性形式表达。随后利用磁珠纯化重组蛋白,采用背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后获得多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光检测结果表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫反应活性,能够与真核表达或病毒的N蛋白发生特异性反应。
- 刘欢姜一峰张文超杨莘周艳君黄勤锋童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达多克隆抗体
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白与宿主细胞DDX5蛋白相互作用研究被引量：5
- 2017年
- 研究利用免疫共沉淀的方法证明猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)N蛋白与MARC-145细胞DDX5蛋白之间存在相互作用,且两种蛋白共定位于MARC-145细胞质内。利用构建的EGFP-N和m Cherry-DDX5真核表达载体共转染MARC-145细胞后,发现N蛋白并不能将DDX5蛋白募集至细胞质。采用si RNA沉默MARC-145细胞DDX5基因表达之后,病毒复制水平上升;荧光定量检测结果显示,DDX5沉默表达也能够明显促进病毒基因组RNA和长链亚基因组RNA的转录水平。结果表明DDX5参与了病毒复制转录过程并对病毒增殖具有抑制作用。
- 刘欢黄勤锋张文超姜一峰杨莘高飞周艳君童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白相互作用
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组猪瘟C株E2蛋白的全长感染性克隆的构建及分析
- <正>1引言猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS)和猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)都是临床上严重威胁养猪业的...
- 高飞姜一峰虞凌雪李丽薇杨莘张段玲刘欢张玉娇周艳君童光志
- 文献传递
