李晓博
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪源粪肠球菌Ace蛋白间接ELISA方法的建立与应用被引量：3
- 2014年
- 根据GenBank已发表粪肠球菌Ace基因(AF260879)的核苷酸序列设计1对引物,通过PCR扩增Ace基因保守序列A片段部分序列,将其克隆到pET-32a(+)裁体中,构建了原核表达载体pET-32a(+)-Ace,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,成功表达并纯化了重组蛋白;以此重组蛋白作为抗原建立了检测粪肠球菌Ace抗体的间接ELISA方法。经反复试验,确定该间接ELISA的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1mg/L,被检血清稀释度为1∶800,1%BSA为封闭液,血清和二抗的作用时间均为60min,底物TMB反应时间为15min,反应的阳性判定值为0.126。交叉试验、批内重复和批间重复试验证明,所建立的间接ELISA方法具有特异性高、重复性好的特点,可用于粪肠球菌Ace蛋白血清抗体的检测。
- 陈丽颖张祥李晓博李英英邵刘云胡慧王亚宾
- 关键词：粪肠球菌ELISA
- 猪源粪肠球菌含LPTXG基序样物质基因表达对其生物被膜形成的影响
- 引言肠球菌是一种广泛存在于人和动物肠道内的重要人畜共患机会致病菌,而肠球菌形成生物被膜的能力与其耐药性具有重要关系,从而影响到细菌的致病力。研究发现,肠球菌具有含LXPTG基序样的蛋白如表面蛋白(Esp)、胶原蛋白黏附素...
- 刘肖李晓博张祥胡慧王亚宾陈丽颖
- 不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响被引量：2
- 2012年
- 为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16S rRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPD PCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16S rRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPD PCR检测中效果最佳.
- 张祥李晓博谷素美段志刚王亚宾胡慧陈丽颖
- 关键词：肠球菌DNA提取PCR
