蒋宏
- 作品数：1 被引量：5H指数：1
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：烟台市科学技术发展计划项目山东省高校科研发展计划项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的定点突变及其原核表达被引量：5
- 2013年
- 目的定点突变幽门螺杆菌标准菌株ATCC26695 hsp60基因的1398、1399位点,并获得基因突变后hsp60基因的原核表达蛋白。方法采用Primer Premier5.0软件设计hsp60基因的2对引物,引入2个突变位点,通过重叠延伸PCR法进行3次扩增,获得突变型hsp60基因,克隆至原核表达载体pEASY-E1,重组质粒转化至E. coli BL21(DE3),对其进行测序验证,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE电泳检测表达产物。结果将幽门螺杆菌hsp60基因1398、1399位点AG突变为GC,构建了突变型hsp60基因的表达载体,转化大肠埃希菌后高效表达可溶性hsp60蛋白。结论构建了突变型hsp60基因表达载体,并能表达可溶性目的蛋白,为对其功能研究奠定了基础。
- 孙万菊杜东龙蒋宏张珍杜镇镇李波清
- 关键词：幽门螺杆菌热休克蛋白60定点突变原核表达
