张敏敏
- 作品数：4 被引量：57H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 我国首次牛结节性皮肤病病毒的分离鉴定被引量：41
- 2020年
- 牛结节性皮肤病(LSD)是由羊痘病毒属牛结节性皮肤病病毒(LSDV)引起的牛的烈性传染病。2019年8月,我国首次在新疆伊犁地区发现疑似LSD疫情。本研究采集伊犁疫情临床症状典型病牛病变皮肤组织,接种羊睾丸(LT)细胞,对出现典型细胞病变的培养物进行了系列鉴定。透射电镜观察到典型痘病毒形态的砖型粒子;山羊痘高免血清间接免疫荧光检测培养病变细胞显示阳性反应;LSDV基因组特异引物PCR检测结果为阳性;二代测序(De novo)全基因组分析显示与LSDV/Russia/Saratov/2017(MH646674.1)同源性最高(99.42%);系统进化分析显示与LSDV/Russia/Saratov/2017株相似,介于疫苗株和野毒株分支之间;病毒生长曲线测定显示感染LT细胞的生长特性与已报道的山羊痘病毒相似。上述结果表明,本实验分离得到引起我国首次LSD疫情的病毒株,命名为LSDV/China/Xinjiang/2019株(Xinjiang/2019),本研究为牛结节性皮肤病的防治奠定了基础。
- 张敏敏孙亚杰刘文兴刘任强王喜军步志高
- 关键词：进化分析
- 表达水疱性口炎病毒G基因重组新城疫病毒的构建及免疫原性研究被引量：6
- 2014年
- 水疱性口炎是由水疱性口炎病毒（VSV）引起的人兽共患性传染病，在我国尚无可用疫苗。为研制安全有效的水疱性口炎疫苗，本研究以新城疫病毒（NDV）LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统为基础，构建并拯救出表达VSV糖蛋白（GP）的重组病毒（rLa-VSV-G）。间接免疫荧光、激光共聚焦、western blot等试验证明VSV-GP在重组病毒中正确表达；体外致病试验结果表明，rLa-VSV-G保持了LaSota亲本株的低致病性和高滴度的鸡胚生长特性；rLa-VSV-G接种4周龄～5周龄BALB／c雌性小鼠后，可以诱导显著的VSV中和抗体反应。本研究表明，重组病毒rLa-VSV—G具有作为防控VSV储备性疫苗的潜力。
- 李晓芳张敏敏葛金英温志远王喜军陈伟业步志高
- 关键词：水疱性口炎病毒糖蛋白重组新城疫病毒免疫原性
- 非洲猪瘟病毒结构蛋白基因重组痘苗病毒的构建及鉴定被引量：6
- 2017年
- 非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种猪的传染病,发病率和死亡率几乎达100%,是尚未传入我国的重要的猪烈性病。为研制安全有效的ASF储备疫苗,本研究利用本实验室改造的痘苗病毒(VV),将ASFV的结构蛋白P72和P54或CD2v和P30的基因分别插入到VV基因组中,构建了同时表达P72和P54的重组VV(rVV-P72-P54)以及同时表达CD2v和P30的重组VV(rVV-CD2v-P30)。Western blot和间接免疫荧光试验表明外源基因在重组病毒感染的细胞中均能够正确表达。这两株重组病毒在体外细胞培养中的增殖效率与亲本病毒无显著差异。该研究为进一步的动物免疫实验奠定了基础。
- 张会雷刘任强张敏敏王喜军葛金英温志远步志高
- 关键词：非洲猪瘟病毒重组痘苗病毒
- 采用非洲地区广泛应用的绵羊痘弱毒株构建表达小反刍兽疫病毒H蛋白的重组疫苗被引量：4
- 2018年
- 为构建表达小反刍兽疫病毒(PPRV)H基因的重组绵羊痘病毒(SPV),本研究利用e GFP报告基因和gpt筛选基因筛选纯化了PPRV H基因的重组SPV(rSPV-PPRV-H)。通过PCR、序列测定和间接免疫荧光的方法对rSPV-PPRV-H进行鉴定。结果显示PPRV的H基因重组至rSPV-PRRV-H中并表达PPRV H蛋白;同时病毒的生长曲线也显示外源H基因的插入并未影响亲本病毒的复制。将该重组病毒经皮内注射途径免疫绵羊,免疫剂量为105.5 TCID50,间隔4周,免疫两次,中和试验结果显示rSPV-PPRV-H免疫绵羊后能够诱导其产生高滴度的抗PPRV的特异性中和抗体,抗体转阳率为100%(6/6)。本研究为rSPV-PPRV-H作为PPRV疫苗提供了实验依据。
- 孙一瑞张敏敏李翠翠李博文陈伟业步志高
- 关键词：小反刍兽疫重组疫苗
