范春娥
- 作品数:4 被引量:8H指数:1
- 供职机构:南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 小鼠脑微血管内皮细胞的分离培养与鉴定被引量:6
- 2017年
- 脑微血管内皮细胞(Brain microvascular endothelial cell,BMVEC)是构成血脑屏障(Brain-blood barrier,BBB)的基本组分,多种神经疾病都与BBB的失功能相关,分离培养原代BMVEC是体外研究BBB功能及其调节的重要手段.本文通过简单有效的葡聚糖密度梯度离心和酶消化方法,从小鼠脑组织分离培养出BMVEC,并用免疫荧光染色进行了鉴定.结果表明,内皮细胞表面特征性的标记分子CD31阳性细胞达到95%以上,同时通过VE-Cadherin及ZO-1免疫荧光染色鉴定证实,其为脑微血管内皮细胞.本研究为体外利用BMVEC进行相关研究提供了良好基础.
- 宋晓彬范春娥王烨张艺腾崔丛丛曾卫卫郑丽蓉蔡晓洁陈华群
- 关键词:脑微血管内皮细胞原代培养密度梯度离心酶消化
- TMEM16A的表达下调对骨骼肌细胞分化的影响
- 2020年
- TMEM16A(Transmembrane Protein 16A)是一种钙离子(Ca^2+)激活的氯离子通道(Calcium-activated Chloride Channels,CaCCs),在机体内广泛表达,具有重要的生理功能.迄今为止,TMEM16A在骨骼肌发育中的作用及机制尚无报道.本研究利用TMEM16A特异性抑制剂T16A inh-A01首次探讨了其表达下调对骨骼肌细胞分化的影响.研究发现,T16A inh-A01处理显著抑制C2C12和原代成肌细胞的肌分化.进一步研究发现,T16A inh-A01明显抑制肌分化过程中生肌素Myogenin的表达.研究结果提示,TMEM16A的钙激活氯通道活性可能参与了骨骼肌细胞的分化过程,具体的作用机制有待进一步研究.
- 袁文范春娥陈宇琛许艳华张茜茜孙志远陈华群
- 关键词:INHC2C12成肌细胞生肌素
- 细胞膜去极化通过激活MAPK信号通路促进原代肌母细胞增殖被引量:1
- 2020年
- 细胞膜去极化可促进某些细胞包括肌卫星细胞的增殖,但去极化对于肌母细胞的作用还不清楚.本文通过培养基中高浓度的钾离子(K^+)引发小鼠原代肌母细胞膜的去极化,采用直接计数法评估细胞的增殖能力.结果显示,在K^+浓度为25 mmol/L的培养基中培养24 h后,肌母细胞数量较常规培养基(5 mmol/L K^+)明显增加,但K^+高至50 mmol/L和100 mmol/L时对细胞增殖没有促进作用.通过流式细胞技术进行细胞周期分析显示,25 mmol/L K^+处理使G1期的细胞数量减少,S期的细胞数量增加.免疫荧光染色和Western blot研究发现,25 mmol/L K^+处理后,对肌母细胞的肌分化能力没有影响.进一步研究发现,25 mmol/L K^+明显促进了肌母细胞MAPK信号通路(ERK1/2)的激活,并与其促进细胞增殖的效应相关.MEK1/ERK1/2的两种抑制剂U0126和PD98059均可减弱细胞膜去极化引起的细胞增殖促进效应.综上,研究结果表明细胞膜去极化通过激活MAPK通路促进小鼠原代肌母细胞的增殖.
- 郑丽蓉许艳华曾卫卫陈宇琛范春娥陈华群
- 关键词:去极化细胞增殖MAPK信号通路
- 甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用被引量:1
- 2015年
- 目的探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。方法取胚胎期13.5d(E13.5)小鼠,4%多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE染色。结果与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。结论利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。
- 李帅陈宇琛张雪茜童仙杰宋晓彬范春娥陈华群
- 关键词:塑料包埋甲基丙烯酸羟乙酯HE染色小鼠