李运锋
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：河南农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 合成引物碱基缺失造成木聚糖酶的移码突变
- 2010年
- 黑曲霉木聚糖酶xynⅢ酶分子改造时,常出现引物碱基缺失造成扩增基因移码突变.本研究将xynⅢ克隆入表达载体pET20b,分析移码突变酶C-端氨基酸序列,探讨了该碱基缺失突变的检测方法.引物中缺失1或2 bp碱基时,扩增基因产生2种移码突变酶,分别在正常酶分子C-端增加30或12个氨基酸,比正常酶分子质量分别增加6或2 ku;而缺失3 bp碱基时不产生移码突变,只比正常酶分子少1个氨基酸,含有6个H is标签;通过SDS-PAGE可将移码突变酶与正常酶分子分开,从而将移码突变基因与正常基因分开,这个理论与DNA测序结果完全吻合.同时发现2 bp碱基缺失突变是1 bp碱基缺失突变的2倍,分析了其产生原因.最后,提出了避免引物中碱基缺失移码突变发生的预防措施.
- 刘亮伟卢雪丽胡瑜李运锋
- 关键词：木聚糖酶引物移码突变
