苏晓田
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 双峰驼clusterin基因的克隆及功能分析
- 2015年
- 为了研究双峰驼clusterin基因真核表达载体的构建及其生理功能,试验采用深圳华大公司提供的clusterin基因片段序列设计PCR引物,以双峰驼肾脏RNA反转录获得的cDNA为模板进行PCR,结合RACE技术获得基因编码序列,将测序结果正确的序列连入pEGFP-N1框架载体以构建真核表达载体,转染海拉细胞。结果表明:PCR产物及酶切片段大小符合预期结果,测序结果与相应寡核苷酸序列一致并成功转染海拉细胞。说明双峰驼clusterin基因真核表达载体构建成功,并成功将骆驼clusterin基因转入海拉细胞,可用于进一步研究clusterin基因在体内的生理功能。
- 苏晓田邢燕平王瑞瑶王亚娟闫涛李浩天周欢敏
- 关键词：双峰驼CLUSTERINPEGFP-N1转染
- 可定点整合的无筛选标记LacS基因表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2015年
- 试验旨在构建一个能够定点整合且无筛选标记基因的半乳糖苷酶基因LacS表达载体。本研究以pEGFP-N1质粒为原始框架,通过PCR及限制性酶切位点在pEGFP-N1质粒的标记基因两端添加两个同向LoxP序列,在多克隆位点上游添加能够定点整合的attB序列,最后再将目的基因BC promoter-LacS-PolyA通过限制性酶切位点插入多克隆位点。每一步都进行PCR、酶切及测序鉴定。PCR产物及酶切片段大小符合预期结果,测序结果也与相应寡核苷酸序列一致,证明各个基因片段正确地连接到载体相应位置。本试验成功构建了可定点整合的无筛选标记半乳糖苷酶基因表达载体pEGFP-N1-LacS。
- 闫涛王瑞瑶朱和平苏晓田王亚娟李浩天周欢敏
