宋婧
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：西南交通大学生命科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家级大学生创新创业训练计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶的原核表达与条件优化被引量：2
- 2016年
- 以川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶基因(LCCOMT)为表达对象,将含有6*His标签的LCCOMT基因连接pET28a表达载体后转化大肠杆菌BL21,采用原核表达的方法,优化了LCCOMT基因的表达条件。结果表明:当诱导时间为4h,IPTG终浓度为2.0mmol·L-1,诱导温度为37℃时,重组LCCOMT蛋白的表达量达到最大。溶解性检测结果表明,LCCOMT重组蛋白以可溶性蛋白的形式存在,占总蛋白的9%,该试验可为LCCOMT的大规模表达纯化奠定基础。
- 宋婧朱建全张泉宝张赶周嘉裕
- 关键词：川芎原核表达
- 川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶的同源建模和定点突变被引量：2
- 2016年
- 目的构建川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶(Ligusticum chuanxiong caffeic acid-3-O-methyltransferase,LCCOMT)的三维模型,并利用定点突变对模型进行验证。方法利用同源建模构建LCCOMT的初始三维模型;对初始三维模型进行动力学优化;将优化后的模型对接咖啡酸,预测LCCOMT的活性位点;对预测的活性位点展开定点突变,检测突变型蛋白的生物活性。结果 LCCOMT的三维模型能够与咖啡酸成功对接,His268残基可能是LCCOMT的活性位点,推测其能够与咖啡酸3-OH形成氢键。H268N与H268Q2种突变酶分别丧失94.85%和95.28%的催促活性。结论同源建模能够准确预测LCCOMT的三维模型。His268为LCCOMT的关键氨基酸残基,其作用可能是作为共轭碱,参与咖啡酸3-OH的去质子化反应。
- 俞继华李洋洋宋婧李娟娟张赶朱建全向缅王万军廖海周嘉裕
- 关键词：川芎同源建模
