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检测烟曲霉菌GM抗原生物素-亲和素-夹心酶联免疫吸附试验法的建立被引量：3: 2002年; 车小燕徐华丘立文潘玉先邱庆林郝卫; 关键词：烟曲霉菌微生物检验

特异性靶向的戊肝嵌合DNA疫苗的构建及免疫效果研究被引量：3: 2002年; 目的制备特异性靶向的嵌合DNA疫苗，并探讨其诱导机体产生免疫应答的效果。方法用基因重组技术构建细胞毒T淋巴细胞抗原4（CTLA4）与戊肝病毒抗原HEVE2嵌合基因的真核表达质粒。同时构建不带CTLA4的pHEVE2作为平行对照质粒，体外转染COS-7细胞，Western blotting法检测细胞培养上清表达并且物；于BALB/c小鼠皮内注射，每隔2周1次，共免疫3次，100μg/次，于免疫的第3、5和10周ELISA检测抗体效价。结果获得pHEVE2和pCTLA4-HEVE2嵌合基因真核表达质粒，测序证实各连接点阅读框序列正确；体外转染COS-7细胞，证明真核质粒以分泌形式表达；接种pCTLA4-HEVE2小鼠产生高滴度的特异性抗HEVE2抗体，比接种pHEVE2的对照组高50-100倍；pCTLA4-HEVE2诱导高水平的IgG2a,IgG2bTh1型抗体和IgG1Th2型抗体应答，pHEVE2则以IgG1Th2型抗体应答为主。结论 CTLA4-HEVE2嵌合DNA疫苗有效地增强动物对HEVE2抗原的免疫应答，为进一步研究抗原靶向性的嵌合DNA疫苗奠定基础。; 车小燕钱其军刘思行黄洁邱庆林徐华吴文翰; 关键词：戊型肝炎病毒病毒性肝炎疫苗 DNA疫苗抗原提呈细胞

EB病毒特异性增强子CAT报告质粒构建策略: 2004年; 构建携带EB病毒特异性增强子oriP不同结构域的CAT报告质粒,以探讨EB病毒特异性增强子与EB病毒核抗原-1结合后的转录增强作用。聚合酶链反应扩增得到增强子oriP全序列,借助于pUC19质粒将其不同结构域克隆到pCAT3Promoter(pCAT3/P)载体。扩增获得oriP全序列;构建得到携带EB病毒特异性增强子Orip不同结构域的CAT报告质粒pCAT3/P-oriP、pCAT3/P-FR、pCAT3/P-DS、pCAT3/P-(FR+DS)等,质粒中目的基因的插入方向经鉴定正确。; 廖志勇车小燕徐华张丽娅潘玉先郝卫; 关键词：EPSTEIN-BARR病毒目的基因

重组SARS冠状病毒棘突蛋白S1区基因片段的克隆、表达及免疫原性研究被引量：2: 2005年; 目的构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)棘突(spike)蛋白(S蛋白)S1区基因(40～2001bp)分段表达载体,并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增S1区基因,将其定向插入pQE30质粒,在pQE30质粒上将S1切成3段(40～751、746～1344、746～2001bp),均插入pQE30质粒,构建质粒在大肠埃希菌M15中表达,表达产物经亲和层析纯化及WesternBlot和ELISA鉴定。结果构建的3种重组质粒(pQE30/S1a、pQE30/S1b、pQE30/S1c)均高效表达,重组蛋白相对分子质量分别为26700、22500和46000,表达量分别占菌体总蛋白质的35%、35%和30%。3种重组蛋白经Ni亲和层析树脂得到成功纯化。经Western-Blot及ELISA证实,重组蛋白片段S1c(746～2001bp)可以被SARS患者血清所识别。结论成功构建了SARS-CoVS蛋白S1区基因分段表达载体,重组蛋白S1c具有较强的免疫原性,它的获得为下一步疫苗的研制奠定了基础。; 梅亚波廖志勇王压娣张丽娅徐华Yuen Kwok Yung车小燕; 关键词：冠状病毒属蛋白质S SARS冠状病毒免疫原性研究基因片段 S蛋白

抗马尔尼菲青霉单克隆抗体的制备和鉴定被引量：9: 2003年; 目的制备和鉴定抗马尔尼菲青霉单克隆抗体(mAb)。方法用基因重组马尔尼菲青霉甘露糖蛋白1(MP1)抗原免疫BALB/c小鼠,制备mAb,并采用ELISA间接法和免疫印迹进行筛选和鉴定。结果筛选出4株稳定分泌抗马尔尼菲青霉mAb杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定均为IgG1,抗体亲和常数分别为8.2×10-9、4.7×10-9、6.5×10-9和2.7×10-9,免疫印迹证实马尔尼菲青霉mAb特异性识别MP1。结论4个杂交瘤细胞株特异性好、亲和力高,为马尔尼菲青霉病的快速诊断奠定了基础。; 丘立文彭冬先徐华贾娟车小燕袁国勇; 关键词：单克隆抗体

非结构蛋白NS1在登革病毒感染早期诊断及分型诊断中的作用: 目前，登革病毒/(DV/)广泛流行于全世界100多个国家和地区，据WHO估计，全球每年约有5千万至1亿人感染登革病毒。我国南方近年来也频发小流行，仅2002年广州和澳门地区就有近万人感染。登革热已经成为一种严重危害人类健...; 徐华; 关键词：登革病毒酶联免疫吸附试验; 文献传递

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徐华