宗书东
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院基础医学研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 用原位杂交法研究兔附睾蛋白BE－20的基因表达
- 1995年
- 兔附睾尾液经ＨＰＬＣ纯化后，获得分子量为２０ｋＤ的附睾特异蛋白，命名为ＢＥ－２０。ＢＥ－２０的抗体具有明显抑制人精子穿透去透明带仓鼠卵的能力。已获得编码ＢＥ－２０的０．５ｋｂｃＤＮＡ片段，命名为ＲＥＤ－２０。用地高辛标记此片段，与兔睾丸、附睾、输精管和肝组织进行原位杂交，观察ＢＥ－２０在各种组织中的定位和表达。采用杂交前热变性与不用热变性组织两种方法进行原位杂交。杂交信号均为紫褐色的颗粒，分布在附睾尾的主细胞和近端输精管的上皮细胞的胞质内，表明胞质内ｍＲＮＡ与地高辛标记ＲＥＤ－２０ｃＤＮＡ探针杂交。组织经热变性后，附睾尾和近端输精管上皮细胞核出现强阳性反应，表明核内的同源ＤＮＡ与地高辛标记的ＲＥＤ－２０ｃＤＮＡ探针杂交。但在睾丸和肝脏内未见杂交信号，提示ＢＥ－２０是附睾尾和近端输精管上皮细胞合成的蛋白质。经分析证明，此蛋白是一种细胞外的蛋白酶抑制剂，可能与防止精子过早获能有关，它是否能用于制备抗生育疫苗有待深入的研究。
- 吴燕婉徐卫东石心泉缪世英宗书东
- 关键词：基因表达原位杂交
- 棉酚对大鼠毒性的电子显微镜观察
- 1979年
- 棉酚对雄性大鼠有明显的抗生育作用^([1,2])。用电镜和同位素放射自显术对服药后大鼠睾丸变化动态的观察表明棉酚主要破坏生精上皮的精子发生过程,其中变态期精子细胞和中、后期初级精母细胞对棉酚的毒性最为敏感^([1])。4000多名志愿服药者的临床试验进一步证明了棉酚的抗生育效果肯定可靠^([3])。精液脱落细胞的分析亦以精子细胞和精母细胞的脱落为主^([4])。棉酚对生精细胞的这种毒性作用,为当前寻找男用避孕药提供了前景。棉酚对其他脏器组织的毒性作用亦已有报道。
- 吴嬿婉宗书东薛社普
- 关键词：电子显微镜观察精子细胞抗生育作用脏器组织棉酚
- 棉酚对男性精子影响的电子显微镜观察
- 1980年
- 本研究报道育龄男子服醋酸棉酚后不同时期精液中精子超微结构改变的观察结果。育龄男性志愿者每日服药剂量为20毫克,连服50天后,改服每周40毫克的维持量,共观察了服药前5例作为自身对照,他们于服药后30天和50天分别再予检查;另对服维持量第84天的7例进行了观察。精液离心之沉渣用戊二醛-锇酸固定,丙酮脱水,Epon 812包埋,电镜观察。观察结果表明,螺旋鞘膜线粒体和顶体-核帽系统是对棉酚最敏感的细胞器,出现损伤最早、最严重,轴丝体和细胞核亦有不同程度的改变。严重的可见整个精子崩溃解体,精液中出现细胞残体和大量脱落细胞。根据上述结果,对棉酚造成精子损伤的性质及其意义予以分析和讨论。
- 杭振镳王远萍干德全刘裕宗书东
- 关键词：浆膜精子结构棉酚
- 一种与Calpastatin具有部分同源结构的人精子膜蛋白的发现与研究被引量：1
- 1994年
- 在以前工作中我们从人精子中分离纯化出一种与生育有关的糖蛋白，命名为ＢＳ－１７。本文用其多克隆抗血清从人睾丸λｇｔ１１ｃＤＮＡ表达库中克隆了编码ＢＳ－１７的ｃＤＮＡ片段。序列分析表明ＢＳ－１７ｃＤＮＡ片段长７９１ｂｐ，开放阅读框架５５８ｂｐ，可编码１８６个氨基酸。经数据库检索，该ｃＤＮＡ片段与人Ｃａｌｐａｓｔａｔｉｎ（Ｃａ￣（２＋）依赖的半胱氨酸蛋白酶ｃａｌｐａｉｎ抑制剂）基因３’端顺序具有９９．７％的同源，与Ｃａｌｐａｓｔａｔｉｎ蛋白质羧基末端同源性为９９．５％。用ｃＲＮＡ进行组织原位杂交结果表明，ＢＳ－１７基因表达于人精子减数分裂后期单倍精细胞阶段。
- 魏曙光缪时英张梅林王琳芳宗书东
- 关键词：原位杂交精液
- 一种与受精有关的人精子膜蛋白（BS－17）的分离纯化被引量：1
- 1994年
- 本文用盐分级分离，ＭｏｎｏＱＦＰＬＣ及ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）等方法从人精子ＣＨＡＰＳ抽提液中分离纯化出一种与不育病人血清中抗精子抗体发生特异反应的ＢＳ－１７人精子膜蛋白。该蛋白为一糖蛋白，分子量为１７．５５±２．１５ｋＤ，等电点为５．６５，中性己糖含量为１６．６７％。在人精子上主要分布于顶体区域，不同于已有报导的人精子膜蛋白。在体外实验中抗ＢＳ－１７多克隆血清可以显著影响人精子的获能（ｐ＜０．０２５）和对去透明带仓鼠卵的穿透（ｐ＜０．００５），但不影响人精子运动性及与去透明酯酸带仓鼠卵的结合。小鼠体内被动免疫实验结果证明抗ＢＳ－１７多抗血清具有明显地抑制受精的功能（ｐ＜０．００１）。
- 魏曙光王琳芳缪时英石心泉宗书东
- 关键词：受精提纯精液
- 抗兔附睾特异性蛋白ESP－2单克隆抗体及其抗生育研究被引量：1
- 1995年
- 兔附睾液中分离纯化了两个特异性蛋白ＥＳＰ－１和２，分子量分别为４２ＫＤ和２０ＫＤ。应用基因克隆技术，又从人睾丸λ－ｇｔｌｌ表达性。ＤＮＡ基因库中筛选分离出一个１．９Ｋｂ的编码ＥＳＰ－２ｃＤＮＡ片段，为了进一步深入研究ＥＳＰ－２做为抗生育疫苗的可能性，本研究用半固体融合细胞培养基法成功地制备了抗ＥＳＰ－２的单克隆抗体，经三轮筛选后获得阳性克隆３８个，经定量分析ＯＤ值均为０．５以上，其中三株命名为ＥＳＰ－２ｍＡｌ、ＥＳＰ－２ｍＡ３和ＥＳＰ－２ｍＡ９，接种于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔之后，腹水滴度均达１∶１００，０００。本研究采用体内外结合的被动免疫抗生育实验，即用抗体处理精子后进行体内抗生育实验，用小鼠双侧子宫互为对照和实验，证明ＥＳＰ－２ｍＡ３，ＥＳＰ－２ｍＡ９单抗对小鼠受精有明显的抑制作用，Ｐ＜０．０５和＜０．０１。对上述两株ＥＳＰ－２抗体的抗受精机理需进一步探讨。
- 吴嬿婉石心泉赵敏缪时英宗书东
- 关键词：免疫疫苗单克隆抗体抗生育
