万敏
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- SGK和14-3-3蛋白与TPO/MPL信号传导的丝氨酸/苏氨酸磷酸化机制有关被引量：4
- 2001年
- 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是调节血小板生成最主要的细胞因子,它的生物学效应由其受体c-Mpl介导.用酵母双杂合系统(two-hybrid system)筛选了与c-Mpl膜内部分相互作用的蛋白质.在5×106个转化子中,得到48个阳性克隆.测序结果表明,其中一个是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SGK(serum and glucocorticoid-inducible kinase)的部分编码序列(编码第246位氨基酸至c末端,包括3′端非编码区);另一个为14-3-3 theta亚型蛋白的部分编码序列(编码第67位氨基酸至C末端,包括3′端非编码区).体外GST-Pulldown分析和免疫共沉淀进一步证实了c-Mpl与它们的相互作用.通过系列缺失研究发现两个蛋白与c-Mpl相互作用的区域都在523～554 aa范围内.用酵母双杂合系统进一步研究SGK和14-3-3蛋白之间的关系,发现两者可能直接相互作用.SGK和14-3-3蛋白可能与TPO/MPL信号传导过程中的丝氨酸/苏氨酸磷酸化有关.
- 冯丽冰杨立敏周伟国黄莉万敏赵寿元李昌本
- 关键词：酵母双杂合系统信号传导
- c-Mpl信号转导相关蛋白的结合域确定被引量：2
- 2003年
- 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是调节血小板生成最主要的细胞因子,它的生物学效应由其受体c Mpl介导.为了确定SGK,14 3 3,Siva,Tom1,Cop9 S3和c MplBP等6种蛋白在c Mpl上的结合区域,构建c Mpl膜内部分系列缺失片段及点突变,用酵母双杂合的方法检测这些片段与上述6种蛋白的结合情况,发现Box1是c Mpl与这6种蛋白结合的主要区域.Box1两侧的序列及C端区域对c Mpl与这6种蛋白的结合也有帮助.将c Mpl膜内部分的第531位Ser(位于Box1内)突变为Ala和Val后,c Mpl与SGK,14 3 3,Tom1和Cop9 S3的结合能力明显下降,提示Ser531可能对c Mpl与这4种蛋白的结合起重要作用.
- 杨立敏冯丽冰黄莉周伟国万敏李昌本
- 关键词：结合域定点突变血小板生成素受体C-MPL功能域
