黄莉
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：复旦大学生命科学学院遗传学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- TNFα基因在小鼠成纤维细胞L929中的调控研究
- 2002年
- 质粒pEGFP 1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体 .将系列缺失的TNFα基因启动子、5′UTR(untranslatedregion)和 3′UTR插入 pEGFP 1中 ,构建了一组重组质粒 .转染L92 9细胞后 ,发现当报告基因EGFP的上游含有包括 5′UTR在内的TNFα基因启动子序列时 ,重组质粒在L92 9细胞中均能表达EGFP .但是 ,当EGFP基因 3′端同时含有TNFα基因的 3′UTR时 ,重组质粒转染L92 9细胞后 ,均不能表达EGFP .因此 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达具有抑制作用 .进一步研究发现 ,在L92 9细胞中 ,TNFα基因的 3′UTR对基因表达的抑制作用需要其 5′UTR的共同参与 ,而且 ,RT PCR实验表明 ,LPS在其他细胞中对TNFα表达起诱导作用的机制在L92
- 林丽珠唐炯喻红黄莉赵寿元李昌本
- 关键词：绿色荧光蛋白L929细胞成纤维细胞
- c-Mpl信号转导相关蛋白的结合域确定被引量：2
- 2003年
- 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是调节血小板生成最主要的细胞因子,它的生物学效应由其受体c Mpl介导.为了确定SGK,14 3 3,Siva,Tom1,Cop9 S3和c MplBP等6种蛋白在c Mpl上的结合区域,构建c Mpl膜内部分系列缺失片段及点突变,用酵母双杂合的方法检测这些片段与上述6种蛋白的结合情况,发现Box1是c Mpl与这6种蛋白结合的主要区域.Box1两侧的序列及C端区域对c Mpl与这6种蛋白的结合也有帮助.将c Mpl膜内部分的第531位Ser(位于Box1内)突变为Ala和Val后,c Mpl与SGK,14 3 3,Tom1和Cop9 S3的结合能力明显下降,提示Ser531可能对c Mpl与这4种蛋白的结合起重要作用.
- 杨立敏冯丽冰黄莉周伟国万敏李昌本
- 关键词：结合域定点突变血小板生成素受体C-MPL功能域
- SGK和14-3-3蛋白与TPO/MPL信号传导的丝氨酸/苏氨酸磷酸化机制有关被引量：4
- 2001年
- 血小板生成素(thrombopoietin,TPO)是调节血小板生成最主要的细胞因子,它的生物学效应由其受体c-Mpl介导.用酵母双杂合系统(two-hybrid system)筛选了与c-Mpl膜内部分相互作用的蛋白质.在5×106个转化子中,得到48个阳性克隆.测序结果表明,其中一个是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶SGK(serum and glucocorticoid-inducible kinase)的部分编码序列(编码第246位氨基酸至c末端,包括3′端非编码区);另一个为14-3-3 theta亚型蛋白的部分编码序列(编码第67位氨基酸至C末端,包括3′端非编码区).体外GST-Pulldown分析和免疫共沉淀进一步证实了c-Mpl与它们的相互作用.通过系列缺失研究发现两个蛋白与c-Mpl相互作用的区域都在523～554 aa范围内.用酵母双杂合系统进一步研究SGK和14-3-3蛋白之间的关系,发现两者可能直接相互作用.SGK和14-3-3蛋白可能与TPO/MPL信号传导过程中的丝氨酸/苏氨酸磷酸化有关.
- 冯丽冰杨立敏周伟国黄莉万敏赵寿元李昌本
- 关键词：酵母双杂合系统信号传导
