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朱旭东: 作品数：44 被引量：99H指数：6; 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>

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乙型肝炎病毒HBx基因的人工转录因子及其应用: 本发明公开了能够特异结合乙型肝炎病毒HBx基因转录调控区的C2H2型三锌指蛋白和六锌指蛋白，以及融合了能够抑制基因转录的效应功能域的人工转录因子，本发明还公开了所述转录调节因子在制备治疗乙型肝炎病毒感染性疾病药物中的应用...; 陈薇赵兴卉黄培堂朱旭东周晓巍徐俊杰付玲; 文献传递

特异识别HIV-1序列的锌指蛋白的表达纯化及其在Biacore CM-5芯片上的固定: 2007年; 目的:为了更好地利用Biacore 3000研究锌指与核酸的相互作用,将特异性识别HIV-15′端一段保守序列的三锌指蛋白固定在CM-5芯片上。方法:将特异性识别HIV-15′端一段保守序列5′-CTGTGTTTG-3′的三锌指基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达重组三锌指蛋白,超声碎菌进行SDS-PAGE分析;包涵体形式的表达产物用盐酸胍溶解后,经一步凝胶柱复性并纯化;随后摸索适宜固定的pH值并通过化学方法进行固定。结果:表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在于超声沉淀中,纯化及柱复性后的蛋白纯度为98.8%,并在CM-5芯片上成功固定。结论:本研究为利用Biacore实时定量研究锌指蛋白与其识别DNA的相互作用进行了尝试。; 刘娟赵兴卉蒋世卫朱旭东黄培堂; 关键词：锌指 HIV-1 包涵体 BIACORE

人工转录因子的研究进展被引量：3: 2005年; 人工转录因子是通过模拟天然转录因子的结构,由人为设计的DNA结合结构域和功能结构域组成。人工转录因子的构建包括DNA结合结构域和功能结构域的构建,通过体外设计筛选或模建,然后进入体内与特异DNA序列结合调控目的基因的表达;目前有关人工转录因子的应用研究主要集中在人类疾病的治疗,药物发现和生产,农业生物技术及基因功能的研究等方面。; 李世崇朱旭东陈昭烈黄培堂; 关键词：人工转录因子 DNA结合结构域功能结构域

Dc-Chol/DOPE介导siRNA对HeLa细胞的高效转染被引量：2: 2005年; 如何把小干涉RNA有效地递送到体内特异的靶细胞是RNA干涉技术发展中的主要障碍。阳离子脂质体DC-Chol/DOPE已经成功地用于DNA药物的体内递送。研究表明DC-Chol/DOPE介导siRNA对HeLa细胞的转染与商品化的转染试剂L ipofectam ine 2000一样高效,而对细胞的毒性则要小得多。; 党颖王应雄朱旭东郭威威王宇新黄培堂; 关键词：脂质体转染小干涉RNA

S100A4表达与胃癌生物学行为及预后的相关性研究被引量：3: 2008年; 目的研究胃癌及对应正常胃黏膜组织中S100A4基因的表达,分析其与胃癌临床病理及预后的相关性。方法QRT-PCR检测20例胃癌及对应正常胃黏膜组织中S100A4 mRNA的转录。构建胃癌组织芯片,免疫组织化学方法检测S100A4蛋白在208例胃癌组织及其配对正常胃黏膜和转移淋巴结组织中的表达。结果20例胃癌中,55%(11/20)S100A4转录水平升高,平均升高倍数为2.31倍,S100A4表达升高者多为有淋巴结转移的进展期胃癌患者。208例胃癌患者中,S100A4在正常胃黏膜、癌灶、淋巴结转移灶的表达阳性率依次为9.4%、28.1%、32.2%,差异具有显著性(P<0.05);癌灶中S100A4表达与肿瘤浸润深度相关,浸润至肌层以下者表达阳性率高于浸润至黏膜和黏膜下层者(P<0.05);进展期胃癌中S100A4表达升高比例(29.3%)高于早期胃癌(9.4%,P<0.05);癌灶以及转移淋巴结组织中S100A4高表达者比低表达者预后差(P<0.05)。多因素分析显示,S100A4在转移淋巴结中的表达水平是胃癌的独立预后影响因子。结论在胃癌的进展过程中存在S100A4的异常表达,该现象是一个散发的晚期事件;对转移淋巴结中S100A4蛋白表达的分析有助于胃癌的预后判断。; 黄海力吴本俨朱旭东尤纬缔王卫华王孟薇; 关键词：胃肿瘤 S100A4基因生物学行为

一种CTCF蛋白的新用途: 本发明公开了一种CTCF蛋白的新用途。本发明提供了抗CTCF的抗体在制备辅助检测肿瘤细胞转移能力的试剂盒中的应用，所述肿瘤细胞为宫颈癌细胞、肝癌细胞或乳腺癌细胞。所述宫颈癌细胞为HeLa细胞，所述肝癌细胞为HepG2细胞...; 朱旭东沈晶晶王荣何莉郭威威黄培堂; 文献传递

重组人内皮抑素滴眼液抑制小鼠角膜新生血管形成的研究被引量：12: 2005年; 　目的　检验重组人内皮抑素对角膜新生血管形成的抑制效果,探索其临床应用价值。方法　用MTT方法检验重组内皮抑素对血管内皮细胞的增殖抑制活性;用重组人内皮抑素滴眼液,治疗小鼠角膜碱烧伤导致的角膜新生血管形成。结果　重组人内皮抑素 10μg/mL时可抑制bFGF刺激下HUVEC的增殖,抑制率达到 42 1% (P<0 05); 100μg/mL的内皮抑素可抑制碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管形成,治疗 7d时新生血管长度较未治疗组减少 30 9%(P<0 01),新生血管化面积减少了 13 7% (P<0 01)。结论　内皮抑素特异地抑制血管内皮细胞增殖,抑制碱烧伤诱导的小鼠角膜新生血管形成,可能成为临床上预防、治疗相关眼科疾患的药物。; 冯怡冯玉梅朱旭东马清钧; 关键词：内皮抑素角膜碱烧伤角膜新生血管形成

转录因子CTCF的克隆、表达及其抗体制备被引量：6: 2004年; 用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增转录因子CTCF的cDNA序列,克隆至pGEM-TEasy载体上。将CTCF蛋白N段的编码序列亚克隆至pET22b(+)载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并用镍柱进行亲和纯化。用纯化后的CTCFN段蛋白免疫家兔,获得CTCF的多克隆抗体,进而用于细胞内CTCF蛋白的免疫印迹检测。; 何莉朱旭东毛志勇朱恒奇黄培堂; 关键词：转录因子抗体制备亚克隆 CDNA序列总RNA

含EGFP报告基因的慢病毒载体的构建及有感染能力病毒的制备: 2015年; 目的:构建含EGFP报告基因的慢病毒表达载体,包装成病毒并测定病毒感染效率。方法:以pEGFP-C1为模板扩增EGFP基因,经PstⅠ和XhoⅠ酶切后与载体连接,得到慢病毒表达载体pLenti6/v5-EGFP;将此载体与包装质粒共转染包装细胞制备病毒,测定不同感染复数(MOI)下病毒的感染效率。结果与结论:构建了含EGFP报告基因的慢病毒表达载体,制备了有感染能力的慢病毒。; 武瑞琴朱旭东周晓巍黄培堂; 关键词：慢病毒载体报告基因

CCCTC-结合因子的表达水平影响其在细胞内的分布被引量：1: 2011年; 目的:研究CCCTC-结合因子(CTCF)的表达水平与其在HeLa和HepG2细胞内分布的关系。方法:利用小干扰RNA敲降CTCF的表达;利用免疫荧光染色检测CTCF在细胞内的分布。结果:在HeLa和HepG2细胞中下调CTCF的表达,检测到CTCF在细胞核内的分布比例减少,而在细胞质内的分布比例相应增加。结论:CTCF的表达水平会影响其在细胞内的分布。; 王荣黄培堂朱旭东