赵继智 作品数:26 被引量:71 H指数:5 供职机构: 郑州人民医院 更多>> 发文基金: 郑州市科技攻关计划项目 郑州市科技领军人才培育计划 云南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
紫杉醇增强肺癌细胞NKG2D配体表达和CIK细胞杀伤活性 被引量:3 2013年 目的研究不同浓度紫杉醇作用人肺腺癌A549细胞48小时后NKG2D配体表达的改变及CIK细胞杀伤活性的变化。方法 采用MTT法测定紫杉醇对A549细胞24小时的50%抑制率(IC50);流式细胞术检测IC50、1/2 IC50、1/4 IC50浓度紫杉醇作用A549细胞48小时后A549细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)表达的变化;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,CIK细胞对IC50浓度的紫杉醇作用前及作用48小时后A549细胞的杀伤活性。结果 不同浓度紫杉醇作用48小时后A549细胞表面MICA、MICB、ULBP2、ULBP3表达显著升高,ULBP1表达降低(P<0.05)。效靶比10∶1、20∶1、30∶1时,CIK细胞对A549细胞的杀伤活性分别为(11.08±1.22)%、(36.22±0.91)%、(45.73±2.00)%;CIK细胞对IC50浓度紫杉醇作用48小时后的A549细胞杀伤活性分别为(20.79±3.33)%,(53.47±1.62)%、(66.39±0.77)%,与作用前比较均明显增强(P<0.05)。结论 紫杉醇作用后能提高A549细胞NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP2、ULBP3)的表达,从而增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。 赵继智 梅家转 张晓娟 刘桂举 冯睿婷关键词:紫杉酚 NKG2D配体 多发性骨髓瘤患者外周血Treg和Th17的水平检测及其临床价值 2025年 目的:检测多发性骨髓瘤患者外周血Treg和Th17水平并研究其临床价值。方法:选择多发性骨髓瘤患者(MM组)及正常健康人(CON)为研究对象,流式细胞仪检测外周血Treg和Th17水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Foxp3及RORγt水平,比较不同临床病理特征中Treg、Th17、Foxp3及RORγt的差异。采用ROC曲线分析Treg联合Th17预测多发性骨髓瘤患者1年预后不良的敏感度和特异度。多因素Cox回归分析多发性骨髓瘤患者死亡的危险因素。结果:MM组患者Treg、Th17、Foxp3及RORγt均高于CON组,差异有统计学意义(P<0.05)。ISS分期III期、r-ISS分期III期、MRD^(+)多发性骨髓瘤患者Treg、Th17、Foxp3及RORγt均显著高于ISS分期I期-II期、r-ISS分期I期-II期、MRD-多发性骨髓瘤患者(P<0.05)。Treg联合Th17预测多发性骨髓瘤1年预后不良敏感度、特异度及AUC均高于Treg、Th17、Foxp3、RORγt、ISS分期、r-ISS分期、微小病灶残留(P<0.05)。Treg≥8.23%、Th17≥3.05%、Foxp3≥1.12、RORγt≥0.94、ISS分期III期、r-ISS分期III期、微小病灶残留MRD^(+)为多发性骨髓瘤患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论:多发性骨髓瘤患者外周血Treg及Th17表达显著升高,与病情及预后密切相关,可作为多发性骨髓瘤病情及预后评估的标志物,两者联合检测时可显著提高预测多发性骨髓瘤预后不良的敏感度及特异度。 冯睿婷 宋银森 赵继智 秦娜 门颖丽关键词:多发性骨髓瘤 TREG TH17 FOXP3 RORΓT 紫杉醇、顺铂、氟脲嘧啶对CIK细胞杀伤食管癌活性的影响 梅家转 刘桂举 李晓华 雷林榆 张晓娟 赵继智 肖鹏 研究背景:食管癌是我省常见肿瘤,尽管采用了手术、放疗、化疗联合治疗模式,食管癌患者总的5年生存率仅14%,因此食管癌仍需要新的治疗方法。2009年3月卫生部办公厅发布84号文件允许自体免疫细胞作为第三类医疗技术用于临床。...关键词: 关键词:食管癌 杀伤活性 配体表达 生物素标记探针检测外周血白细胞端粒长度的应用研究 2009年 目的建立生物素标记测定端粒DNA长度的方法,探讨其法医学应用价值.方法基因组DNA经RsaI和HinfI限制性内切酶消化,0.8%琼脂糖凝胶电泳,Southern印迹转移,以5'末端生物素标记寡核苷酸(TTAGGG)3为探针进行杂交,化学发光检测DNA谱带,与DNA标准分子量比较计算端粒长度.结果通过严格控制印迹转移条件、探针的工作浓度、杂交温度等主要影响因素,获得了比较好的杂交条带.结论生物素标记探针检测端粒DNA长度方法稳定、可靠,无放射污染,杂交信号明显. 聂胜洁 赵继智 易晓佳 景强 吴静 许冰莹关键词:生物素标记 SOUTHERN杂交 端粒 IL-12增强CIK细胞对食管癌EC9706细胞的杀伤活性 被引量:10 2013年 目的:探讨IL-12对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞的表型和CIK细胞在体外对食管癌EC9706细胞杀伤活性的影响。方法:体外分离人外周血单个核细胞,分为两组:对照组以IFN-γ、IL-2和CD3单抗诱导培养CIK细胞;IL-12组在对照组基础上加用IL-12培养。培养至第14天,流式细胞仪检测两组CIK细胞的免疫表型;LDH释放法测定效靶比20∶1、30∶1时两组CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性;观察效靶比30∶1时,NKG2D单抗对两组CIK细胞杀伤活性的影响。结果:IL-12组与对照组相比较,CIK细胞免疫表型的CD3+CD56+细胞比例[(28.23±1.71)%vs(16.34±0.59)%,P<0.05]、CD3+细胞及CD3+CD56+细胞中NKG2D的表达[(77.45±2.15)%vs(66.87±0.73)%,(92.94±0.77)%vs(82.18±0.66)%;均P<0.05]、CD3+细胞中穿孔素的表达[(51.78±0.63)%vs(43.54±0.95)%,P<0.05]都明显增强;CD3+细胞颗粒酶B表达无明显变化[(26.90±0.67)%vs(26.76±0.33)%,P>0.05)]。效靶比20∶1和30∶1时,IL-12组CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性均较对照组明显增强[(43.92±1.67)%vs(35.34±1.22)%,(55.95±0.88)%vs(43.91±1.10)%;均P<0.05];以NKG2D单抗阻断后,IL-12组、对照组CIK细胞杀伤活性均明显下降[(19.72±0.56)%vs(55.95±0.88)%,(19.83±1.20)%vs(43.91±1.10)%;均P<0.05]。结论:IL-12能够上调CIK细胞NKG2D和穿孔素的表达,从而增强CIK细胞对EC9706细胞的杀伤活性。 梅家转 刘桂举 张晓娟 赵继智关键词:NKG2D 食管癌 IL-12 肝癌组织中p57^kip2基因表达缺失与甲基化的关系 被引量:2 2009年 p57^kip2属于CIP/KIP家族成员,抑制细胞周期从G1期到S期转化,使细胞周期停滞在G1期,进而阻止细胞增殖。肝癌组织中普遍存在p57^kip2mRNA表达水平的下降,提示p57^kip2与肝癌发生关系密切。本研究采用原位分子杂交和甲基化特异性PCR方法检测p57^kip2 mRNA的表达及启动子区甲基化情况,探讨p57^kip2基因失表达机制。 赵继智 章宗籍 申丽娟 程若川 张华献 钱忠义关键词:肝细胞 DNA甲基化 厄洛替尼增强肺腺癌A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性 被引量:3 2013年 目的:研究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼对人肺腺癌A549细胞NKG2D配体表达及CIK细胞杀伤活性的影响及其分子机制。方法:流式细胞仪检测厄洛替尼、EGFR下游分子LY294002(PI3K抑制剂)、SB203580(MAPK抑制剂)、STAT21(STAT3抑制剂)作用A549细胞24 h后A549细胞NKG2D配体的表达。乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时,CIK细胞对10μmol/L厄洛替尼作用前、后A549细胞的杀伤活性。结果:厄洛替尼下调A549细胞MICA表达,上调MICB、ULBP1表达,EGFR下游分子MAPK、STAT3抑制剂不影响A549细胞NKG2D配体的表达,PI3-K抑制剂下调A549细胞MICA表达,厄洛替尼增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。结论:EGFR TKI抗肺癌作用与其增强肺癌细胞对免疫细胞杀伤的敏感性有关。 刘桂举 梅家转 张晓娟 赵继智 冯睿婷关键词:表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 细胞因子诱导杀伤细胞 NKG2D配体 顺铂与CIK细胞对A549细胞杀伤协同作用机制的初步研究 被引量:5 2013年 目的:探讨不同浓度顺铂作用人肺腺癌A549细胞24h后,NKG2D配体表达的改变及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)杀伤活性的变化。方法:MTT法测定顺铂作用A549细胞24h的50%抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测IC50、1/2IC50和1/4IC50浓度顺铂分别作用A549细胞24h后,A549细胞表面NKG2D配体表达的变化,配体包括MHC-I类链相关分子MICA和MICB以及人巨细胞病毒糖蛋白UL16结合蛋白ULBP1、ULBP2和ULBP3;乳酸脱氢酶释放法检测不同效靶比时,CIK细胞对IC50浓度的顺铂作用前及作用24h后A549细胞的杀伤活性。结果:不同浓度顺铂作用24h后,A549细胞表面MICA(F=12.490,P=0.002)、MICB(F=41.492,P<0.001)、ULBP2(F=375.773,P<0.001)和ULBP3(F=59.594,P<0.001)表达均显著升高;ULBP1表达降低,F=55.693,P<0.001。效靶比10∶1时,IC50浓度顺铂作用24h前、后的A549细胞的杀伤活性分别为(11.88±1.57)%和(17.64±1.44)%,F=21.770,P=0.010;20∶1时分别为(35.56±1.98)%和(46.39±3.51)%,F=21.653,P=0.010;30∶1时分别为(45.03±1.74)%和(73.81±1.62)%,F=439.578,P<0.001。结论:顺铂提高A549细胞NKG2D配体MICA、MICB、ULBP2和ULBP3的表达,增强A549细胞对CIK细胞杀伤的敏感性。 张晓娟 梅家转 赵继智 冯睿婷 刘桂举关键词:顺铂 NKG2D配体 化疗 HER2阳性乳腺癌组织中MICA/B的表达及其临床意义 被引量:7 2017年 目的:通过检测MHC-Ⅰ类分子链相关蛋白A/B(MHC classⅠchain-related protein A/B,MICA/B)在HER2阳性乳腺癌组织中的表达水平,探讨其与患者临床病理特征的关系。方法:收集2009年1月至2010年6月在南方医科大学附属郑州人民医院乳腺外科手术切除的HER2阳性乳腺癌标本62例及其临床资料,免疫组化法检测乳腺癌组织中MICA/B的表达水平,分析其与患者临床病理特征的关系。结果:MICA/B表达率为90.32%,高表达为64.52%。MICA/B的表达与患者的临床分期、ER、PR表达有关(均P<0.05),与绝经、淋巴结转移、组织学分级无关(均P>0.05)。结论:MICA/B的表达可能与HER2阳性乳腺癌的发生发展有关,有望成为免疫治疗的新靶点。 李景艳 梅家转 赵继智 刘桂举关键词:人表皮生长因子受体2 NKG2D 流式细胞术分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素对实验结果的影响 被引量:2 2021年 目的探讨流式细胞术(FCM)分析血液淋巴细胞免疫表型方法学因素对实验结果的影响。方法以FCM分析血液淋巴细胞免疫表型,分析不同时间测定淋巴细胞、单核细胞与中性粒细胞表面白细胞共同抗原含量,不同设门方法测定淋巴细胞百分比,不同染色方法分析淋巴细胞免疫表型差异,找出影响实验结果的相关因素。结果血液标本放置1 h、6 h、8 h后淋巴细胞白细胞共同抗原含量对比,差异无统计学意义(P>0.05);血液标本放置1 h、6 h、8 h后单核细胞、中性粒细胞白细胞共同抗原含量对比,差异显著(P<0.05);散射光设门、荧光/散射光设门、三色荧光/侧向角散射光测定的GL、TL对比,差异显著(P<0.05);单色、双色、三色法分析T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T+B+NK细胞对比,差异显著(P<0.05)。结论FCM分析血液淋巴细胞免疫表型实验结果受标本放置时间、淋巴细胞设门方法与染色方法影响,临床需选取最佳检测时间、淋巴细胞设门方法与染色方法,以提高分析结果准确性。 冯睿婷 赵继智关键词:流式细胞术