李剑龙
- 作品数：5 被引量：3H指数：1
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科学研究与技术开发计划广西研究生教育创新计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 大肠杆菌嗜盐α-淀粉酶基因的分子改造及其酶学特性被引量：1
- 2016年
- 【目的】对大肠杆菌Escherichia coli嗜盐α-淀粉酶基因进行改造,并探索嗜盐α-淀粉酶的嗜盐特性。【方法】从非嗜盐的大肠杆菌JM109中克隆到一个嗜盐α-淀粉酶基因k6并进行重组表达。通过同源建模,确定Na+结合位点上的氨基酸残基,并对相应位点进行定点突变。最后对突变酶的酶学性质进行研究。【结果】相对于野生酶,突变酶更加嗜盐,其最适NaCl浓度由2mol/L增加到3mol/L,最适pH值为7,最适温度为50℃,酶活力为4 831U/mg,提高近4倍。经HPLC检测,突变酶与2%(W/V)可溶性淀粉反应后的产物为葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖的混合物。【结论】嗜盐α-淀粉酶基因k6的嗜盐特性与Na+结合位点具有直接联系。
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- 关键词：同源建模
- 嗜盐α-淀粉酶的鉴定及其与嗜盐相关的氨基酸残基研究
- 嗜盐α-淀粉酶具有独特的盐适应机制，使其在各种高盐等极端环境中，依然能够高效、稳定地行使其生物催化能力，在精密化工、水产、食品及其诊断试剂等众多行业中，都具有广阔的应用前景。目前，虽然嗜盐酶的相关研究已经成为一个热点，但...
- 李剑龙
- 关键词：氨基酸残基
- 文献传递
- 嗜盐淀粉酶产生菌的筛选鉴定及其酶学性质研究被引量：2
- 2014年
- [目的]筛选分离新的嗜盐淀粉酶产生菌，并对其进行酶学性质研究。[方法]从广西大学奶牛厂的奶牛粪便土壤中分离得到一株能产耐盐淀粉酶的菌株，利用16S rRNA 序列对比进行鉴定，经破胞提取胞内总蛋白测定嗜盐淀粉酶酶学性质。[结果]经16S rRNA 初步鉴定该菌株为阴沟肠杆菌属（Enterobacter cloacae ）。该菌株是非嗜盐菌株，却能产生一种胞内嗜盐淀粉酶。酶学性质研究表明该酶在 NaCl 终浓度为4mol/L 时，酶活力最强，当盐浓度为5．5mol/L 时，仍能保持最高酶活的60％；以 MOPS-NaCl 配制的1％可溶性淀粉溶液为底物时，其最适反应温度为50℃，最适 pH 值为6．5，pH 值在4．5～8．5时均能保持60％以上的相对活力；在35～45℃的温度范围内显示较好的稳定性，相对酶活保持在80％以上，但当温度达到50℃时，酶活力急剧下降；Ca2＋浓度对酶活力几乎没有影响；EDTA 浓度在10～140mmol/L 时酶活力变化不大，大于140mmol/L 之后，酶活力逐渐下降。[结论]该菌株是在非嗜盐菌株中发现的具有嗜盐淀粉酶基因的菌株，其嗜盐淀粉酶在高盐环境下具有很高的酶活力。
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- 关键词：阴沟肠杆菌酶学性质
- 阴沟肠杆菌嗜盐淀粉酶基因的克隆、鉴定和嗜盐机理研究
- 从广西大学奶牛厂的奶牛粪便土壤中分离得到一株能产耐盐淀粉酶的菌株,经16S rDNA鉴定该菌株为阴沟肠杆菌属(Enterobactercloacae)。根据Genbank中阴沟肠杆菌属基因组序列注释为淀粉酶(amylas...
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- 文献传递
- 阴沟肠杆菌嗜盐淀粉酶基因的克隆、鉴定和嗜盐机理研究
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