陶一明 作品数:43 被引量:254 H指数:9 供职机构: 中南大学湘雅医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
区域性肝血流阻断的中央型肝癌切除术 王志明 陶一明 黄云 刘喜武 周乐杜 李新营 李劲东出血坏死表型肝细胞癌肿瘤微血管特征研究 被引量:5 2016年 目的:探讨出血坏死表型肝细胞癌(HN-HCC)瘤内微血管(MV)特征。方法:收集104例HCC样本,其中HN-HCC 72例,非HN-HCC(NHN-HCC)32例。将每例HCC样本均划分为癌组织中央区、肿瘤中心到肿瘤边缘中间区、肿瘤边缘区3个区域,分别比较两种类型HCC样本对应区域间MV形态特征以及血管生成相关基因BTB/POZ结构域蛋白7(BTBD7)、缺氧诱生因子1α(HIF-1α)、促血管生成素2(Ang-2)的m RNA表达的差异。结果:HCC瘤内MV形态分为肿瘤细胞簇包绕型血管(VETC)、毛细管状血管(CV)和两者混合型(VETC+CV)。两者相应区域间比较,HN-HCC各区域VETC阳性率均高于NHN-HCC(65%vs.29%、76%vs.9%、70%vs.16%),CV阳性率均低于NHN-HCC组(23%vs.55%、3%vs.72%、11%vs.59%),差异均有统计学意义(均P<0.05),但VETC+CV阳性率均无差异(均P>0.05);HN-HCC各区域BTBD7,HIF-1α,Ang-2 m RNA的表达水平均高于NHN-HCC(均P<0.05)。结论:HN-HCC瘤内MV形态构筑紊乱且血管生成相关基因异常表达,可能是导致肿瘤局部缺血缺氧及侵袭转移重要原因。 陶一明 王志明关键词:出血 坏死 微血管 WAVE2调控肝癌细胞Na+离子通道促进侵袭转移的作用机制 王志明 陶一明 黄云 刘喜武miR-342-5p调控靶基因Merlin表达促进肝细胞癌侵袭转移的实验研究 被引量:3 2014年 目的:探讨miR-342-5p及其可疑靶基因Merlin在肝细胞癌(HCC)中表达及意义。方法:用qRT-PCR检测miR-342-5p和Merlin mRNA在HCC组织与癌旁组织,以及正常肝细胞系与各种不同HCC细胞系中的表达;用重组慢病毒包装质粒pGCSIL-GFP-miR-342-5p或空载体(阴性对照)转染HCCLM3细胞,以无处理的HCCLM3细胞作为空白对照,划痕愈合及Transwell实验观察细胞侵袭运动能力;Western blot法检测细胞中Merlin蛋白的表达。采用双荧光素酶基因报告系统,将含野生型或突变型Merlin基因3'UTR质粒(psiCHECK-Merlin)分别与pGCSIL-GFP-miR-342-5p、空载体(阴性对照)共转染或单独转染(空白对照)HCCLM3细胞后,检测各组细胞荧光素酶活性。结果:与癌旁组织比较,HCC组织中miR-342-5p表达明显上调,Merlin mRNA表达明显下调(均P<0.05);HCC组织中,血管侵犯组较无血管侵犯组miR-342-5p表达明显上调,Merlin mRNA表达明显下调(均P<0.05),且miR-342-5p与Merlin mRNA表达呈负相关(r2=5.364,P<0.05)。各HCC细胞系中miR-342-5p表达均明显高于正常肝细胞系,且miR-342-5p的表达随HCC细胞系的侵袭性增高而上调,而Merlin mRNA表达则呈相反趋势(均P<0.05)。与空白对照组及阴性对照组比较,HCCLM3细胞转染pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒后,细胞侵袭运动能力明显下降(均P<0.05),而Merlin蛋白表达明显上调。psiCHECK-Merlin野生型与pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒共转染HCCLM3细胞后,细胞的荧光素酶活性较其阴性对照组或空白对照组明显降低(P<0.05),而psiCHECK-Merlin突变型与pGCSIL-GFP-miR-342-5p质粒共转染HCCLM3细胞后,细胞的荧光素酶活性与其空白对照组或阴性对照组无统计学差异(P>0.05)。结论:Merlin是miR-342-5p的靶基因,miR-342-5p可能通过调控MerlinmRNA的表达促进肝细胞癌侵袭转移。 胡宽 陶一明 黄云 李新营 王志明关键词:肝细胞 微RNAS MERLIN 肿瘤侵润 老年人肝细胞癌切除术后复发与微血管密度的关系 2009年 目的探讨患者年龄对肝细胞癌(HCC)切除术后尤瘤存活率的影响以及老年人HCC复发与微血管密度(MVD)的关系。方法回顾性分析71例老年人HCC肝切除术病例,以同期352例非老年HCC病例作对照,结合随访资料分析年龄对无瘤存活率的影响。采用免疫组织化学SABC法检测30例老年人和30例非老年人HCC组织中CD34和endocan的表达情况,研究微血管密度与老年人HCC预后的关系。结果老年组1、3、5年无瘤存活率分别为75.7%、43.0%、43.0%,非老年组分别为53.6%、38.5%、33.4%,老年组的无瘤存活率大于非老年组,差异有统计学意义(Log Rank值为10.25,P〈0.05)。老年组术前血清叫胎蛋白(AFP)阳性率为47.9%,低于非老年组(62.2%),差异具有统计学意义(Х^2=23.68,P〈0.05)。高CD34-MVD组和高endocan—MVD组的中位生存时间分别为260d和360d,低CD34-MVD组和低endocan—MVD组的中位生存时间分别为850d和800d,差异均有统计学意义(Log Rank值分别为22.18和20.56,P〈0.05)。结论老年人HCC肝切除术后的长期预后好于非老年组,老年人HCC术后复发转移与血管生成密切相关。 黄耿文 陶一明 丁翔 鲁伟群 刘合利关键词:肝细胞 肝切除术 血管生成 腺苷酸基琥珀酸裂解酶在胃癌中的表达及其临床意义 被引量:1 2023年 背景和目的:腺苷酸基琥珀酸裂解酶(ADSL)是嘌呤从头生物合成的必需酶,参与调控肿瘤嘌呤核苷酸、细胞周期和细胞增殖重要功能。然而,它在胃癌(GC)中的表达与作用仍不十分清楚。因此,本研究探讨ADSL在GC组织中的表达与作用以及与局部晚期GC新辅助化疗的关系。方法:利用TCGA队列中的配对GC和正常组织表达数据,通过TNM plot、人类蛋白图谱、UALCAN、STRING数据库,分析ADSL表达及临床意义。用荧光定量PCR检测24例在湖南省肿瘤医院接受新辅助化疗(SOX方案5例、XELOX方案7例、FLOT方案12例)的局部晚期GC患者的组织标本中ADSL表达。结果:数据库分析结果显示,与正常胃组织相比,GC组织中的ADSL mRNA和蛋白表达明显性增加,且ADSL过表达患者与预后较差。ADSL表达与磷酸核糖甲酰基甘氨脒合酶、磷酸核糖氨基咪唑羧化酶等呈明显正相关。ADSL表达涉及p53信号通路、Wnt信号通路、miroRNA(microRNA)调控以及细胞周期调控。行不同新辅助化疗方案后的GC组织中ADSL mRNA表达均明显高于各自的癌旁组织,相对另两种方案,行FLOT方案的患者临床客观缓解率较高,GC组织ADSL mRNA表达较低。结论:ADSL在GC组织中表达升高,且与不良预后密切相关。ADSL有望成为局部晚期GC新辅助化疗疗效的标志物。 曾德余 罗嘉 陶一明 裴雷 殷先利关键词:胃肿瘤 肿瘤辅助疗法 AIBP在肝癌细胞中的表达及意义与含AIBP基因及AFP启动子驱动的双自杀基因表达载体构建 被引量:1 2013年 目的:探讨载脂蛋白A-I结合蛋白(AIBP)在肝癌细胞中的表达及意义。方法:用RT-PCR与Western blot法分别检测正常肝细胞株L02,AFP阳性人肝癌细胞株HepG2和Hep3B,及AFP阴性人肝癌细胞株SMMC7721中AIBP基因与蛋白的表达;构建AFP启动子驱动的双自杀基因(CD,TK)+AIBP基因过表达载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK,并转染Hep3B和SMMC7721细胞,用MTT法检测转染后细胞的增殖能力,用RT-PCR和Western blot法检测细胞AIBP,血管内皮生长因子(VEGF),VEGF受体2(VEGFR-2),基质金属蛋白酶9(MMP-9)基因和蛋白的表达。结果:AIBP mRNA和蛋白在正常肝细胞中高表达,而在各肝癌细胞系中均表达下调,且Hep3B和SMMC7721细胞中下调明显。成功构建pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK真核表达质粒并转染入Hep3B和SMMC7721细胞。转染后AFP阳性Hep3B细胞生长到明显抑制,但AFP阴性SMMC7721细胞增殖不受影响;两种细胞的AIBP基因与蛋白表达均明显上调,而VEGFR-2,VEGF和MMP-9基因与蛋白表达明显表达下调。定量指标间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:AIBP在肝癌细胞中表达下调,AIBP与肝癌细胞的侵袭转移能力有关,而与细胞增殖能力无关;成功构建了联合基因载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK。 黄云 王志明 陶一明 刘喜武关键词:载脂蛋白A-I 血管内皮生长因子受体2 热疗联合а-IFN逆转人肺腺癌细胞A549/CDDP耐药性的研究 被引量:2 2009年 目的探讨热疗联合α-IFN对人肺腺癌细胞A549/CDDP耐药逆转作用及可能机制。方法采用体外细胞培养技术,培养人肺腺癌细胞系A549及其耐药株A549/CDDP。设计1μg/ml、2μg/ml、4μg/ml浓度的CDDP,分别联合100U/ml、500U/ml、1000U/ml浓度а-IFN,在42℃热疗干预2h后,采用MTT法检测2种细胞对化疗药物CDDP的敏感性,采用流式细胞仪间接免疫荧光法,检测α-IFN、CDDP、热疗处理前后细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达及细胞内荧光药物CDDP的聚集量。结果热疗、а-IFN分别联用CDDP时,对A549/CDDP细胞的抑制率较单用CDDP时的抑制率高,差异有统计学意义(P<0.05)。热疗联合а-IFN与CDDP时,对A549/CDDP细胞的抑制率较热疗、а-IFN分别联用CDDP时明显升高(P<0.05)。热疗、а-IFN分别联合CDDP时,A549/CDDP细胞P-gp表达率较单用CDDP时下降,细胞内荧光强度增强,热疗联合α-IFN与CDDP,CDDP/A549P-gp表达率明显下降,细胞内荧光强度显著增强。结论а-IFN、热疗能部分逆转人肺腺癌细胞系A549/CDDP的耐药性;а-IFN联合热疗可提高逆转肺癌细胞耐药效应,其机制可能与抑制P-gp表达,增加细胞内化疗药物的积聚有关。 刘振洋 陶一明 向芳 曹培国 殷先利关键词:热疗 Α-干扰素 P-糖蛋白 SIPA1基因在肝癌中的表达及其与肝癌预后的关系 被引量:4 2007年 目的研究SIPAI(signal-induced proliferation-associated gene 1)基因在肝细胞癌(HCC)中的表达情况及其临床意义。方法采用实时定量PCR检测30例新鲜HCC标本中SIPA1 mRNA相对含量。用免疫组织化学S-P法检测86例石蜡HCC标本和8例正常肝组织中SIPA1的表达情况,研究其与HCC临床病理学资料及预后的关系。结果与癌旁组织比较,在癌组织中SIPA1 mRNA表达下调(t=2.216,P=0.045)。86例HCC中,SIPA1在癌组织的阳性表达率和癌旁组织中阳性表达率分别为43.0%(37/86)和87.2%(75/86)(χ^2=36.96,P〈0.01)。有静脉侵袭的肝癌标本中癌旁组织SIPA1呈低表达(U=647.50,P=0.019)。SIPA1蛋白在癌旁组织中表达存在个体差异,低表达组术后复发率较高(P=0.000),生存期较短(P=0.006)。结论SIPA1在HCC中可能发挥肿瘤抑制基因的作用,且对抑制HCC的复发转移有重要作用。 刘合利 杨连粤 陶一明 王伟 黄耿文 房锋 吴帆关键词:肝细胞 肿瘤转移 实时定量PCR 免疫组织化学 胃癌SGC7901细胞长春新碱耐药性相关miRNA的初步分析 被引量:2 2013年 目的探讨胃癌SGC7901细胞对长春新碱(VCR)化疗药物耐药相关的微小RNA(miRNA),并预测异常表达miRNA的靶基因。方法体外培养胃癌SGC7901细胞和胃癌VCR耐药细胞SGC7901/VCR;提取总RNA并质检,采用miRNA 8.0微阵列芯片检测分析miRNA表达谱;荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)验证差异表达的miRNA,生物信息学分析软件预测可能调控的靶基因;采用Western blot方法检测靶基因的蛋白表达水平。结果芯片检测发现,SGC7901和SGC7901/VCR细胞中63个异常表达的miRNA;其中miR-1267、miR-221、miR-223、miR-200c、miR-99a表达显著性上调;miR-122、miR-1246、miR-302a、miR-195、miR-124表达显著性下调。在胃癌细胞和胃癌组织中验证结果初步显示,miRNA-122和miR-302a可能分别调控靶基因IGF-IR和WDR62。结论获得的差异表达miRNA,以及预测的靶基因IGF-IR和WDR62可能在胃癌化疗药物VCR耐药中起关键性作用。 陶一明 陈子华 陈晋湘 陈志康 葛杰关键词:胃癌 MIRNA SGC7901 VCR 多药耐药