张祯祯
- 作品数：8 被引量：17H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- microRNA相关实验技术被引量：1
- 2007年
- microRNA是一种长约19～23nt的小分子单链RNA，本身不编码蛋白质，主要存在于基因非编码区；其在生物个体发育、组织分化，以及病毒感染和肿瘤发生中都具有一定作用。文章综述了近年来microRNA寻找及其功能研究等实验方法，以此了解microRNA实验研究进展。
- 张祯祯黄爱龙
- 关键词：MICRORNA编码蛋白质非编码区个体发育组织分化肿瘤发生
- 短发夹状双链RNA抑制丙型肝炎病毒IRES介导的基因表达被引量：1
- 2006年
- 目的研究载体表达的短发夹状双链RNA(shRNA)对丙型肝炎病毒(HCV)IRES介导的基因表达的特异性抑制作用。方法构建HCV IRES调控的绿色荧光蛋白表达载体(pIRES-GFP)和虫荧光素酶表达载体(p5’ UTR-Luc),以及针对HCV IRES的shRNA表达载体(pshRNA-HCV),共转染HepG2细胞,于转染后24、48,72 h 观察绿色荧光的强弱,用Western blot检测绿色荧光蛋白的表达,半定量逆转录聚合酶链反应法检测GFP的mRNA水平,双荧光素酶系统检测虫荧光素酶活性。结果pshRNA-HCV作用组绿色荧光强度明显弱于未干扰组,GFP蛋白表达量及虫荧光素酶活性降低60％-70％,半定量逆转录聚合酶链反应显示pshRNA-HCV导致了GFP基因mRNA水平的降低。结论针对HCV IRES的shRNA能够显著和特异地抑制该区域调控的蛋白表达水平及mRNA水平,该研究结果为利用RNA干扰技术治疗HCV感染进行了初步探索。
- 陈维贤单林娜陈娟张祯祯张秉强黄爱龙
- 关键词：RNA干扰基因治疗
- 二甲双胍治疗NASH的临床评价
- 2008年
- 目的:评价二甲双胍治疗NASH的临床疗效。方法:入选病人随机分为对照和治疗组,分别给予保肝、饮食运动综合治疗和在此基础上的二甲双胍治疗。结果:BMI、FI、ALT、AST、GGT等均有明显改善。结论:二甲双胍治疗NASH的临床疗效是肯定的。
- 郝美君张祯祯程丽英黄爱龙
- 关键词：二甲双胍NASH
- 型特异引物PCR法分析238株乙肝病毒基因型被引量：5
- 2008年
- 目的:研究乙肝病毒(HBV)感染者HBV基因型分布状况,并建立一套HBV病毒株分型的简便可靠的分析法。方法:设计型特异引物,采用基因型特异引物聚合酶链反应(PCR)法分型。结果:238株HBV中218株得到分型。其中B型149例(男115例、女34例);C型63例(男47例、女16例);B+C混合型6例(男4例、女2例)。B型、C型和B+C混合型检出率分别为68.3%(男69.3%、女65.3%)、28.9%(男28.3%、女30.8%)和2.8%(男2.4%、女3.8%)。未检出A、D、E、F、G、H基因型。结论:HBV感染者以B基因型为主。基因型B检出率显著高于其它基因型,其差异具有统计学意义(P<0.01)。HBV各基因型分布与性别无关(P>0.01)。
- 曾爱中黄爱龙郭进军黄文祥李青岭张祯祯郝美君
- 关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应
- 抗HBsAg单克隆抗体的制备与生物学特性的鉴定
- 2008年
- 目的：制备分泌抗HBVS蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并鉴定其特性，为建立快速诊断HBV感染的方法奠定基础。方法：以重组乙肝疫苗免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合建立了能稳定分泌抗HBsAg单抗的杂交瘤细胞株，利用间接ELISA技术和Western blot进行单抗特异性的鉴定，同时采用间接ELISA方法鉴定mAb的Ig亚类，检测mAb的效价及相对亲和力。结果：获得1株可分泌特异性mAb的杂交瘤细胞4D2，其抗体亚类为IgG1型，腹水效价为1：106，相对亲和力在10^5以上。结论：成功地制备出抗HBVS蛋白的单克隆抗体，为建立快速特异检测HBV感染的实验方法提供了有力的工具。
- 王雪梅赖梅梅张晓丽张祯祯陈婧张君黄爱龙
- 关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎表面抗原单克隆抗体
- 短发夹状双链RNA抑制HCV IRES介导的基因表达
- 目的:研究载体表达的短发夹状双链RNA(shRNA)对丙型肝炎病毒(HCV)内部核糖体进入位点(IRES) 介导的基因表达的特异性抑制作用。方法:利用PCR方法获得HCV IRES片段,定向克隆至载体pEGFP-N1 和...
- 陈维贤陈娟张祯祯张秉祥黄爱龙
- 文献传递
- HepG2细胞中HCV NS5A蛋白对HCV IRES启动蛋白翻译的影响
- 2007年
- 目的探讨HepG2细胞中HCV非结构蛋白5A（NS5A）对HCV IRES启动蛋白翻译的影响，以了解HCV的复制调控机制。方法将构建的表达双荧光素酶的双顺反子载体pCMV-Rluc-IRES-Fluc和含HCV NS5A基因的表达质粒pcDNA-NS5A共转染HepG2细胞，用双荧光素酶检测系统检测虫荧光素酶的表达水平，细胞免疫荧光技术检测HCV-NS5A蛋白的表达，RT-PCR检测虫荧光素酶基因mRNA水平，并与相应对照做比较，以观察HCV NS5A对HCV IRES介导虫荧光素酶翻译水平的影响。结果转染pcDNA-NS5A的HepG2细胞中虫荧光素酶活性明显高于转染pCDNA3．I-3flag的对照组，并存在剂量依赖关系；而RT-PCR虫荧光素酶基因mRNA水平在两组间差异无统计学意义。转染pcDNA-NS5A的HepG2细胞质中可见HCV NS5A蛋白的表达。结论HCV NS5A蛋白对HCV IRES介导虫荧光素酶的翻译有正调节作用，并存在剂量依赖关系．
- 陈娟陈维贤张祯祯黄爱龙
- 关键词：丙型病毒非结构蛋白质类HCVIRES
- B和C基因型乙型肝炎病毒对阿德福韦酯治疗的病毒学应答比较被引量：10
- 2008年
- 目的阐明不同基因型HBV对阿德福韦酯治疗反应是否存在差异。方法首先利用型特异引物PCR法结合型特异核苷酸分析法检测HBV基因型，然后根据基因型对阿德福韦酯Ⅲ期临床资料进行分析及统计学处理（计量资料用t检验，计数资料用卡方检验）。结果177例临床标本检出B基因型HBV感染者102例，C基因型感染者65例，B＋C混合型感染者6例，B＋D混合型感染者4例。治疗第12、24周时，B基因型组和C基因型组血清HBVDNA下降均值分别为2.2log10拷贝／ml、2.1log10拷贝／ml和2.7log10拷贝／ml、2．4log10拷贝／ml，两组差异均无统计学意义（P〉0．05），第48周时两组HBVDNA分别下降3.6log10拷贝／ml和3．1log10拷贝／ml，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗结束时（48周）B基因型组和C基因型组分别有43例（42．2％）和22例（33．8％）出现血清HBVDNA转阴，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组患者HBeAg阴转率和抗-HBe血清转换率分别为30．4％、29．2％和21．6％、20．0％，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组患者血清ALT复常率在治疗第12、24、36周和48周时分别为35．3％、33．9％，51．0％、53．9％，63．4％、61．5％和83．3％、81．5％，各时间段两组ALT复常率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿德福韦酯治疗慢性乙型肝炎48周时，部分病毒学指标（如血清HBVDNA下降均值和HBVDNA阴转率）B基因型优于C基因型HBV感染者。但由于阿德福韦酯起效较慢，抑制病毒作用相对较弱，有必要延长治疗时间进一步证实这一现象。
- 曾爱中邓惠彭凤英辛小娟杨春李青岭郭进军张祯祯赫美君袁喆黄文祥黄爱龙
- 关键词：肝炎乙型肝炎病毒基因型阿德福韦酯
