唐磊
- 作品数:6 被引量:12H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
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- 幽门螺杆菌感应调节蛋白CrdR的原核表达及其在酸适应调控中的作用
- 目的:原核表达幽门螺杆菌26695标准株的感应调节蛋白CrdR,并初步探讨其在酸适应调控中的作用,为从细菌适应环境的生理角度探索抗感染的新途径提供实验材料和实验依据。
方法:以提取的幽门螺杆菌26695标准株基因组...
- 唐磊
- 关键词:幽门螺杆菌原核表达
- 幽门螺杆菌CrdS蛋白的原核表达和初步鉴定
- 2013年
- 原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)酸适应感应蛋白CrdS,探讨其酸适应的调控机制。提取H.pylori26695标准株全基因组DNA作为模版,PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,构建重组克隆质粒pUCm-T-hp1364和原核表达质粒pQE30-hp1364,经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌XL1blue,IPTG诱导表达CrdS蛋白。结果表明:通过Western blot鉴定和SDS-PAGE分析该重组蛋白的相对分子质量约为46kDa,主要以包涵体形式存在。原核表达并成功获得的H.pylori CrdS蛋白,能够为探讨其酸适应的调控机制和新的抗H.pylori感染的途径提供实验材料。
- 聂佳莹杨致邦唐磊黄进
- 关键词:幽门螺杆菌原核表达
- 幽门螺杆菌感应蛋白CrdS的原核表达及生物信息学分析
- 2013年
- 目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感应蛋白CrdS,并对其进行生物信息学分析,以探讨其酸适应的调控机制。方法从H.pylori 26695标准株全基因组DNA中PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,插入原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-hp1364,转化大肠埃希菌(E.coli)XL1-blue,IPTG诱导表达重组CrdS蛋白。表达的重组蛋白经Western blot鉴定后,进行生物信息学分析。结果重组表达质粒pQE30-hp1364经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为46 000,表达量占菌体总蛋白的30%,主要以包涵体形式存在,可与Rabbit anti His-Tag Polyclonal Antibody特异性结合;生物信息学分析显示,CrdS的核苷酸序列和氨基酸序列与其他H.pylori菌株(HpG27、F30、B38)具有高度同源性,表面有许多亲水性区域,含多种易被磷酸化的氨基酸。结论成功原核表达了H.pylori CrdS蛋白,并进行了生物信息学分析,为进一步探讨CrdS的感应机制及通过阻断信号感应抗H.pylori感染的途径提供了实验材料。
- 聂佳莹杨致邦唐磊黄进蒋英
- 关键词:幽门螺杆菌原核细胞生物信息学
- 脂溢洗剂治疗湿热型头皮脂溢性皮炎的临床研究
- 目的:本课题拟通过随机对照临床研究,观察脂溢洗剂治疗湿热型头皮脂溢性皮炎的临床疗效、平均起效时间、马拉色菌有效清除率、不良反应和复发率,为临床治疗湿热型头皮脂溢性皮炎提供新的方法。方法:选取2020年9月30日至2021...
- 唐磊
- 关键词:头皮脂溢性皮炎湿热证中药洗剂
- 中药体外抗幽门螺杆菌试验方法研究被引量:11
- 2013年
- 目的探讨简便适用的中药体外抗幽门螺杆菌(Hp)试验的定性、定量方法。方法制备Hp选择琼脂平板,将中药药液倍比稀释后,制备含不同药物浓度的Hp选择琼脂平板,产气袋法培养Hp。先用打孔法定性测定中药制剂对Hp的抑菌作用,再用固体培养基连续稀释法和滴注法定量测定中药制剂对Hp的MBC。结果用4×105CFU/ml浓度菌液,1︰16稀释的试验药打孔法可测出抗Hp的抑菌圈;固体培养基连续稀释法和滴注法测得试验药对Hp的MBC为1︰40。结论利用打孔法、固体培养基连续稀释法和滴注法可测定中药制剂体外抗Hp效果。
- 聂佳莹唐磊杨致邦王茂杨邓西川
- 关键词:幽门螺杆菌中药体外抗菌试验
- 幽门螺杆菌CrdR蛋白的原核表达
- 2013年
- 目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CrdR蛋白(即HP1365),以探讨其在酸适应中的调控机制。方法从H.pylori 26695标准株基因组DNA中PCR扩增hp1365基因,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,转化E.coli JM109,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pGEX-hp1365经双酶切、PCR和测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为25 000,主要以包涵体形式表达,可与鼠抗His标签单克隆抗体特异性结合。结论原核表达了H.pylori CrdR蛋白,为进一步探讨其对酸信号的感应机制及其通过阻断酸信号的感应抗H.pylori感染的途径奠定物质基础。
- 唐磊杨致邦聂佳莹黄进
- 关键词:幽门螺杆菌原核细胞基因表达