聂佳莹
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌感应蛋白CrdS的原核表达及生物信息学分析
- 2013年
- 目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感应蛋白CrdS,并对其进行生物信息学分析,以探讨其酸适应的调控机制。方法从H.pylori 26695标准株全基因组DNA中PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,插入原核表达载体pQE30,构建重组表达质粒pQE30-hp1364,转化大肠埃希菌(E.coli)XL1-blue,IPTG诱导表达重组CrdS蛋白。表达的重组蛋白经Western blot鉴定后,进行生物信息学分析。结果重组表达质粒pQE30-hp1364经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为46 000,表达量占菌体总蛋白的30%,主要以包涵体形式存在,可与Rabbit anti His-Tag Polyclonal Antibody特异性结合;生物信息学分析显示,CrdS的核苷酸序列和氨基酸序列与其他H.pylori菌株(HpG27、F30、B38)具有高度同源性,表面有许多亲水性区域,含多种易被磷酸化的氨基酸。结论成功原核表达了H.pylori CrdS蛋白,并进行了生物信息学分析,为进一步探讨CrdS的感应机制及通过阻断信号感应抗H.pylori感染的途径提供了实验材料。
- 聂佳莹杨致邦唐磊黄进蒋英
- 关键词：幽门螺杆菌原核细胞生物信息学
- 幽门螺杆菌CrdS蛋白的原核表达和初步鉴定
- 2013年
- 原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)酸适应感应蛋白CrdS,探讨其酸适应的调控机制。提取H.pylori26695标准株全基因组DNA作为模版,PCR扩增编码CrdS蛋白的基因hp1364,构建重组克隆质粒pUCm-T-hp1364和原核表达质粒pQE30-hp1364,经PCR、双酶切和测序鉴定正确后,转化大肠埃希菌XL1blue,IPTG诱导表达CrdS蛋白。结果表明:通过Western blot鉴定和SDS-PAGE分析该重组蛋白的相对分子质量约为46kDa,主要以包涵体形式存在。原核表达并成功获得的H.pylori CrdS蛋白,能够为探讨其酸适应的调控机制和新的抗H.pylori感染的途径提供实验材料。
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- 关键词：幽门螺杆菌原核表达
- 中药体外抗幽门螺杆菌试验方法研究被引量：11
- 2013年
- 目的探讨简便适用的中药体外抗幽门螺杆菌(Hp)试验的定性、定量方法。方法制备Hp选择琼脂平板,将中药药液倍比稀释后,制备含不同药物浓度的Hp选择琼脂平板,产气袋法培养Hp。先用打孔法定性测定中药制剂对Hp的抑菌作用,再用固体培养基连续稀释法和滴注法定量测定中药制剂对Hp的MBC。结果用4×105CFU/ml浓度菌液,1︰16稀释的试验药打孔法可测出抗Hp的抑菌圈;固体培养基连续稀释法和滴注法测得试验药对Hp的MBC为1︰40。结论利用打孔法、固体培养基连续稀释法和滴注法可测定中药制剂体外抗Hp效果。
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- 关键词：幽门螺杆菌中药体外抗菌试验
- 幽门螺杆菌CrdR蛋白的原核表达
- 2013年
- 目的原核表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CrdR蛋白(即HP1365),以探讨其在酸适应中的调控机制。方法从H.pylori 26695标准株基因组DNA中PCR扩增hp1365基因,克隆至表达载体pGEX-6P-1中,转化E.coli JM109,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果重组表达质粒pGEX-hp1365经双酶切、PCR和测序鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为25 000,主要以包涵体形式表达,可与鼠抗His标签单克隆抗体特异性结合。结论原核表达了H.pylori CrdR蛋白,为进一步探讨其对酸信号的感应机制及其通过阻断酸信号的感应抗H.pylori感染的途径奠定物质基础。
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- 关键词：幽门螺杆菌原核细胞基因表达
- 幽门螺杆菌感应蛋白CrdS的原核表达及其在酸适应调控中的作用
- 目的:原核表达并纯化幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CrdRS信号传导系统中的感应蛋白CrdS，并进行生物信息学分析，通过体外酸环境培养实验，探讨其在H.pylori酸适应调控中的作...
- 聂佳莹
- 关键词：幽门螺杆菌原核表达
