杜祎
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C的原核表达及活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的原核表达脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C,并检测其生物学活性。方法以脓肿分枝杆菌标准株(ATCC19977)基因组DNA为模板,PCR扩增非溶血性磷脂酶C基因,克隆至pQE-30载体,构建重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经Ni2+-NTA层析纯化后,采用杯碟法检测其生物学活性。结果重组原核表达质粒pQE-30-MAB_0555经PCR、双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为53 000,纯化后蛋白浓度为0.40 mg/ml,具有溶解蛋黄中卵磷脂的酶活性,无溶血活性。结论成功地在大肠杆菌DH5α中表达了非溶血性磷脂酶C,为进一步研究其生物学功能及其在脓肿分枝杆菌致病机制中的作用提供了材料,也为研制脓肿分枝杆菌临床治疗药物及寻找新的药物作用靶点提供了思路。
- 王志刚杨致邦杜祎石中全邓西川周雪
- 关键词：脓肿分枝杆菌原核细胞基因表达生物活性
- 脓肿分枝杆菌非溶血性磷脂酶C蛋白MAB_0555基因克隆测序及生物信息学分析
- 2012年
- 目的克隆脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus,M.abscessus)非溶血性磷脂酶C基因MAB_0555,并对其测序以及生物信息学分析,为进一步研究其生物学功能及其在脓肿分枝杆菌致病机制中的作用提供基础。方法以脓肿分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增非溶血性磷脂酶C的基因片段,克隆入pQE-30质粒,构建重组原核表达载体pQE-30-MAB_0555,将其转化入大肠埃希菌DH5α,并进行序列测定及利用生物信息学软件DNAstar 5.0分析其生物学特性。结果 PCR扩增获得长1440 bp的MAB_0555基因片段,编码479个氨基酸,DNAstar等软件预测其蛋白质相对分子量(Mr)约为53 kD,并显示出具有良好的抗原性。结论成功获得序列正确的脓肿分枝杆菌MAB-0555基因,为其重组蛋白的表达及其相关研究奠定基础。
- 王志刚杨致邦董蕾杜祎石中全邓西川
- 关键词：脓肿分枝杆菌克隆
- 渗透压对大肠埃希菌水通道蛋白G1pF基因表达的影响
- 目的： 探讨大肠埃希菌(Escherichia coli，E.coli)在不同渗透压、渗透压突然改变的培养基中的生长情况，培养基渗透压突然改变后对其水-甘油通道蛋白(glycerol protein ficilitat...
- 杜祎
- 关键词：大肠埃希菌渗透压生理功能
- 文献传递
- 渗透压对大肠埃希菌水通道蛋白GlpF基因表达的影响
- 目的： 探讨大肠埃希菌（Escherichia coli, E.coli）在不同渗透压、渗透压突然改变的培养基中的生长情况，培养基渗透压突然改变后对其水-甘油通道蛋白（glycerol protein ficili...
- 杜祎
- 关键词：大肠埃希菌渗透压RT-PCR
- 文献传递
- 渗透压突然改变对大肠埃希菌水通道蛋白GlpF基因表达的影响
- 2012年
- 目的探讨水-甘油通道蛋白(glycerol protein ficilitator,GlpF)的生理功能及对细菌生长繁殖的影响。方法将大肠埃希菌接种于等渗透压的液体培养基(1 IM)培养,18 h后,突然改变培养液的渗透压,在30、60、120 min时间点检测细菌的A600 nm值,RT-PCR分析其GlpF的表达。结果突然改变渗透压后,大肠埃希菌数量均有不同程度的减少。在1/2 IM组、1/4 IM组细菌的A600 nm值与其各自对照组相比,变化并不明显,但其细菌GlpF表达量明显降低。在高渗组,2 IM组的A600 nm值与等渗组相比变化不大,而其GlpF表达量明显高于等渗组。结论在环境渗透压突然改变时,细菌可以通过调控GlpF的表达来实现对细菌细胞内外水份的调节,以维持胞内环境稳定。
- 杜祎杨致邦王志刚石中全
- 关键词：大肠埃希菌渗透压
