罗念
- 作品数：6 被引量：29H指数：2
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- 吴茱萸碱对人结肠癌细胞周期阻滞及凋亡的影响被引量：8
- 2014年
- 目的探讨吴茱萸碱对人结肠癌细胞周期阻滞及凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养人结肠癌HCT-116细胞分别加入吴茱萸碱1.5,3.0,6.0和12μmol·L-1继续培养24,48和72 h,CCK-8法检测吴茱萸碱对HCT-116细胞存活的影响;用流式细胞术检测吴茱萸碱对HCT-116细胞凋亡和细胞周期的影响;倒置显微镜镜下观察细胞形态变化;荧光显微镜观察Hoechst染色后细胞凋亡的形态学改变;Western蛋白质印迹法检测细胞周期蛋白A1的表达及凋亡相关蛋白P53,Bax,Bcl-2,激活型胱天蛋白酶3的表达。结果吴茱萸碱1.5,3.0和6.0μmol·L-1作用24,48和72 h后,HCT-116细胞增殖受到抑制(P<0.05),且呈时间(r时间=0.744,P<0.05)和浓度(r浓度=0.953,P<0.01)依赖性。吴茱萸碱作用HCT-116细胞48 h后,S期细胞由正常对照组的(13.9±7.0)%增加至(39.7±11.7)%(P<0.05);细胞凋亡率由正常对照组的(4.2±3.0)%增加至(14.9±5.8)%(P<0.05)。光学显微镜下可见,随着药物浓度的增加,细胞的形态发生改变,胞膜破裂,产生细胞碎片,并出现大量漂浮细胞;Hoechst染色可见部分细胞出现细胞核固缩、核发白、染色质凝集等凋亡变化;P53、Bax和激活型胱天蛋白酶3蛋白表达增加,Bcl-2、细胞周期蛋白A1蛋白表达下降。结论吴茱萸碱能够通过下调细胞周期蛋白A1的表达;激活P53信号通路,下调Bcl-2、上调Bax,破坏Bcl-2/Bax的比例;激活胱天蛋白酶3,共同促进人结肠癌HCT-116细胞的凋亡。
- 赵绿翠张景勍游智梅李科琼罗念李静
- 关键词：吴茱萸碱细胞凋亡细胞周期
- 二烯丙基二硫对人白血病KG1-α细胞增殖的影响
- 2014年
- 目的 ：探讨二烯丙基二硫（diallyl disuli de,DADS）对人白血病细胞系KG1-α增殖的抑制作用及其对丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2,PKM2）的影响。方法 ：首先采用蛋白质印迹法筛选PKM2高表达的白血病细胞株;CCK-8（cell counting kit-8）法检测不同浓度的DADS（50～400μmol/L）作用24、48和72 h后,对高表达PKM2的白血病细胞株KG1-α增殖的影响;FCM法检测对KG1-α细胞周期的影响,Hochest 33258染法色观察对KG1-α细胞凋亡形态学的影响;蛋白质印迹法检测PKM2、PIN1、细胞周期蛋白D1以及p21蛋白的表达;免疫荧光法检测PKM2在细胞质及细胞核中的分布情况。结果 ：PKM2在KG1-α细胞中高表达;CCK-8结果显示,DADS在50～400μmol/L浓度范围内对KG1-α细胞均有明显的抑制作用;FCM法检测结果显示,DADS（50和100μmol/L）作用48 h后,药物组中G0/G1期细胞所占的比例明显增加;Hochest 33258染色结果显示,DADS诱导后KG1-α细胞呈现典型的凋亡形态学改变;DADS作用8 h后,蛋白质印迹法和免疫荧光检测结果均显示,PKM2蛋白在细胞核中的表达水平呈下调趋势;PIN1蛋白的表达水平下调;DADS作用48 h后,KG1-α细胞中细胞周期蛋白D1的表达水平下调,而p21蛋白的表达水平上调（P均〈0.05）。结论 ：DADS对KG1-α细胞增殖抑制的机制可能与下调PKM2的表达,并使其细胞周期阻滞在G0/G1期有关。
- 罗念陈地龙左国伟夏菁游智梅李丹阳冯子强石庆强赵绿翠李静
- 关键词：白血病二烯丙基二硫丙酮酸激酶细胞周期
- 二烯丙基二硫化物对人白血病KG1-α细胞增殖及凋亡的影响及其机制的研究
- 背景目的: 白血病是高发的造血系统恶性肿瘤，其治疗以化疗、骨髓移植为主。而由于部分化疗药物的耐药及化疗严重副作用，白血病的预后较差，因此迫切需要寻找新的有效的治疗方法或者药物靶点。 二烯丙基二硫化物（diallyl ...
- 罗念
- 关键词：二烯丙基二硫白血病肿瘤细胞凋亡免疫荧光法
- 人参皂苷Rh2抑制肝癌HepG2细胞迁移的实验研究被引量：20
- 2015年
- 目的：研究人参皂苷Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移的影响及其机制。方法：取对数生长期Hep G2细胞,Rh2（10~160μmol/L）诱导,同时设空白对照组,用CCK-8检测Rh2对细胞增殖影响;Transwell检测Rh2对细胞的迁移的影响;荧光素报告基因筛选可能的信号通路;Western blot检测Hep G2细胞中P-ERK、ERK、P-P38、P-38、P-JUK、JUK、MMP3等蛋白的表达;定量PCR方法检测AP1、MMP3基因的表达;荧光显微镜分别观察AP1、MMP3蛋白在细胞内的表达及分布。结果：CCK-8检测结果显示Rh2对肝癌Hep G2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性;Transwell检测显示Rh2对肝癌Hep G2细胞迁移有明显的抑制作用;荧光素报告基因筛选出AP1转录因子;Western blot检测结果显示P-ERK、MMP3蛋白表达水平呈下降趋势,PJUK、P-P38蛋白表达水平明显升高,ERK、JUK、P38蛋白则无明显变化;定量PCR方法结果显示：AP1、MMP3的基因表达下降。荧光结果显示：AP1、MMP3均分布在胞质内,随药物浓度的增加其荧光表达量减弱。结论：人参皂苷Rh2可通过激活MAPK通路来抑制肝癌Hep G2细胞的迁移。
- 冯子强左国伟石庆强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：HEP迁移MAPK通路MMP3
- 曲古抑菌素对HepG2细胞增殖的影响及相关机制被引量：2
- 2014年
- 目的：研究曲古抑菌素（TSA）对HepG2细胞凋亡的影响及可能的机制。方法取对数生长期HepG2细胞，TSA（50-500 nmol/L）诱导，同时设空白对照组，用CCK-8检测细胞增殖影响；流式细胞术检测细胞周期；Annexin V-FTIC/PI双染细胞检测凋亡；倒置显微镜观察细胞形态并采图；Western blot检测HepG2细胞中β-catenin、HDAC1、HDAC3、H3K9、CyclinD1、Bax等蛋白的表达。定量PCR方法检测HDAC1，HDAC3基因的表达。结果 CCK-8检测结果显示TSA对肝癌HepG2细胞生长抑制呈剂量和时间依赖性；流式细胞术检测细胞周期表明，药物组细胞G0/G1期所占比例增加，S期所占比例下降，G2/M所占比例增加；细胞凋亡检测表明，空白对照组凋亡率（6.22±0.25）%；250 nmol/L组凋亡率（7.17±0.20）%；500 nmol/L组凋亡率（18.14±0.42）%；倒置显微镜下观察可见，随着时间推移空白对照组细胞生长良好；而药物组细胞则出现变形，有大量漂浮细胞；Western blot检测结果显示β-catenin、H3K9和Bax蛋白表达水平均明显升高，CyclinD1、HDAC1、HDAC3的表达水平则呈下降趋势；定量PCR结果显示：HDAC1、HDAC3基因的表达无明显变化。结论 TSA可通过抑制HDAC的活性，促进组蛋白乙酰化，活化Wnt/β-catenin信号通路来发挥其抑制HepG2细胞增殖，诱导周期阻滞及凋亡的作用。
- 石庆强左国伟冯子强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：HEPG2细胞曲古抑菌素凋亡Β-CATENIN组蛋白乙酰化
- 人参皂苷Rh2通过激活Gsk-3β削弱β-catenin在肝癌HepG2细胞中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的：研究人参皂苷Rh2对HepG2细胞的作用机制。方法：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞,运用荧光显微镜观察细胞荧光强度变化。通过CCK-8法检测细胞增殖反应。采用FCM检测细胞周期及凋亡变化;利用ELISA法检测细胞产生Gsk-3β活性;用PCR法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达;用CHIP法检测细胞Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3基因的表达;运用Western blot法检测细胞Gsk-3β、β-catenin、Bcl2、CyclinD1、Bax、MMP3蛋白的表达。结果：用pLOV-EF1a-MCS-3FLAG-β-catenin慢病毒感染HepG2细胞,被感染的HepG2细胞命名为HepG2-β-catenin;CCK-8分析结果显示,加药组给予（10-160μmol/L）Rh2后HepG2及HepG2-β-catenin细胞的增殖受到抑制,且Rh2对肝癌HepG2-β-catenin和HepG2细胞的生长抑制呈剂量和时间依赖。在HepG2细胞中48、72 h半数抑制率分别为100μmol/L,58.12μmol/L,在HepG2-β-catenin细胞中48、72 h半数抑制率分别是129.2μmol/L,83.33μmol/L,故Rh2作用于HepG2-β-catenin细胞浓度均高于HepG2细胞,与HepG2细胞组比较差异具有统计学意义（P〈0.01）。FCM检测结果显示,Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞周期阻滞在G0/G1期,HepG2＋Rh2组G0/G1期（64.57±0.65）,而HepG2-β-catenin＋Rh2组G0/G1期（58.61±2.01）;FCM检测结果显示,Rh2可诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞早期凋亡,HepG2＋Rh2组凋亡率（17.27±2.77）,而HepG2-β-catenin＋Rh2组凋亡率（9.02±1.76）。ELISA结果显示,Rh2作用HepG2细胞12、24、48、72 h后,Gsk-3β的活性随着作用时间延长,逐渐升高,在48 h最高,随后其活性开始降低。Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞48 h,与对照组相比,Gsk-3β的活性均增高,而加入Bio后其活性降低,HepG2＋Rh和HepG2-β-catenin＋Rh2组间无明显差异;PCR、CHIP、WB结果显示,人参皂苷Rh2诱导HepG2和HepG2-β-catenin细胞后,Gsk-3β、Bax基因及蛋白表达增加,而β-catenin、CyclinD1、Bcl2、MMP3基因及�
- 石庆强左国伟冯子强赵绿翠罗念游智梅夏菁李丹阳李静陈地龙
- 关键词：人参皂苷RH2HEPG2GSK-3ΒΒ-CATENIN
