陈湘林
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：解放军第153中心医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人sCR1真核表达载体的构建、表达及其生物学活性被引量：4
- 2008年
- 目的:采用酵母细胞分泌型载体pPIC9k表达人可溶性补体受体(sCR1),研究重组人sCR1融合蛋白的体外生物学活性。方法:从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,然后将其克隆入毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k中,构建含人sCR1的重组质粒(pPIC9k-sCR1),经测序鉴定正确,电转化入毕赤酵母细胞SMD1168中,将经G418抗性筛选出的重组sCR1酵母细胞株进行PCR鉴定,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后进行生物学活性鉴定。结果:获得毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k-sCR1,经G418筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母细胞株,经甲醇诱导含pPIC9k-sCR1的酵母SMD1168细胞表达出重组sCR1融合蛋白。此蛋白在SDS-PAGE上表现为Mr约31000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别。经Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后得到较纯的sCR1融合蛋白及较高的生物学活性。结论:人sCR1融合蛋白在酵母细胞表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原性及其生物学活性。
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- 关键词：生物学活性真核表达载体
- 剧烈运动致军校学员急性肾功能衰竭1例报道被引量：1
- 2010年
- 1病例资料
患者,男,23岁,某军校学员。于2008年6月10日参加五公里越野训练时昏倒,20分钟后清醒,伴体温升高至39℃,经治疗体温恢复正常。次日开始出现咖啡色尿且量少,乏力,纳差。在校医院经对症治疗效果不明显。6月15日晚出现恶心、呕吐,肢体抽搐,意识不清,伴牙关紧闭。急诊入我院。
- 王文丽宫璀璀王广兰刘爱玲孟明利陈湘林
- 关键词：军校学员急性肾功能衰竭病例资料
