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重组sCR1在毕赤酵母细胞中的表达、纯化及鉴定被引量：1: 2008年; 目的:酵母细胞SMD 1168表达人sCR1,并对重组蛋白进行纯化。方法:从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,将其克隆入真核表达载体pPIC9K,构建含人sCR1的重组质粒(pPIC9K-sCR1);经测序鉴定正确后,将重组质粒转化入毕赤酵母菌细胞SMD 1168中,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析及W estern b lot鉴定,并通过N i2+-NTA agarose亲和层析纯化。结果:经甲醇诱导的含pPIC9K-sCR1的酵母细胞表达出重组人sCR1的融合蛋白,48~72 h sCR1融合蛋白表达量最高。此蛋白在凝胶上表现为M r大于31 KDa的蛋白区带,在W estern b lot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别。经N i2+-NTA agarose亲和层析纯化后得到较纯的sCR1融合蛋白。结论:人sCR1融合蛋白在酵母细胞表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原活性。; 王广兰宫璀璀王文丽刘亚利刘琰邰苏豫; 关键词：蛋白表达

力平脂治疗老年人高血脂症的疗效: 1994年; 力平脂治疗老年人高血脂症的疗效王春华，王文丽，赵学杰，李丰，陈朝蓬，孙天玉（中国人民解放军第１５３中心医院郑州４５００６５）力平脂（ｌｉｐａｎｔｈｙ，１００ｍｇ胶囊剂）是法国科尼大药厂生产的一种新型降脂药物，属苯乙酸类降脂药物。国内外应用效果良好。现...; 王春华王文丽赵学杰李丰陈朝蓬孙天玉; 关键词：力平脂降脂药物苯乙酸疾病分类

兔抗人sCR1抗体制备及临床初步应用被引量：2: 2010年; 目的原核表达人sCR1分子胞外区,制备多克隆抗体,建立双抗体夹心ELISA法。方法提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28a-sCR1,转化大肠埃希菌,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,以其免疫家兔制备抗血清。经纯化并鉴定特异性后建立双抗体夹心ELISA法检测血清中sCR1水平,探讨其对慢性病毒性肝炎及活动性SLE患者的诊断价值。结果研制的兔抗人sCR1抗体ELISA法效价为125 000,纯度和特异性较好。30例健康献血者血清中sCR1为(39.8±7.9)ng/ml;22例慢性病毒性肝炎患者为(48.5±24.7)ng/ml;9例活动性SLE患者为(36.3±17.6)ng/ml。结论制备的兔抗人sCR1抗体效价及特异性较好,用其建立的双抗体夹心ELISA法有望用于临床血清学的诊断。; 王广兰刘亚利初霞张长远宫璀璀王文丽高天蓝星; 关键词：多克隆抗体补体受体1型

重组人sCR1真核表达载体的构建、表达及其生物学活性被引量：4: 2008年; 目的:采用酵母细胞分泌型载体pPIC9k表达人可溶性补体受体(sCR1),研究重组人sCR1融合蛋白的体外生物学活性。方法:从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCR1全长cDNA,然后将其克隆入毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k中,构建含人sCR1的重组质粒(pPIC9k-sCR1),经测序鉴定正确,电转化入毕赤酵母细胞SMD1168中,将经G418抗性筛选出的重组sCR1酵母细胞株进行PCR鉴定,经甲醇诱导,表达产物经SDS-PAGE分析和Western blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后进行生物学活性鉴定。结果:获得毕赤酵母细胞分泌型表达载体pPIC9k-sCR1,经G418筛选及PCR鉴定得到高拷贝整合的重组酵母细胞株,经甲醇诱导含pPIC9k-sCR1的酵母SMD1168细胞表达出重组sCR1融合蛋白。此蛋白在SDS-PAGE上表现为Mr约31000的蛋白区带,在Western blot分析中可被sCR1的CD35单克隆抗体(mAb)识别。经Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后得到较纯的sCR1融合蛋白及较高的生物学活性。结论:人sCR1融合蛋白在酵母细胞表达系统中的高水平表达,并且有与人体天然蛋白相同的抗原性及其生物学活性。; 王广兰宫璀璀王文丽张长远刘亚利何培霞郑淑娜陈湘林; 关键词：生物学活性真核表达载体

老年冠心病患者血清胆红素与血脂的关系: 2000年; 目的 :观察老年冠心病血清胆红素和血脂的关系。方法 :测定血清总胆红素和TG、HDL C、LDL C含量。结果 :冠心病组血清胆红素含量明显降低。结论 :血清胆红素的降低使冠心病的发病率增加。; 王文丽; 关键词：冠心病胆红素血脂老年人

多肿瘤标志物蛋白芯片检测对卵巢癌的诊断价值: 目的探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统（C12）对卵巢肿瘤的诊断价值,进一步筛选出阳性率较高的肿瘤标志物并观察联合检测的阳性率。方法用C12定量检测43例卵巢浆液性、粘液性肿痈患者、58例妇科附件炎症及相应良性肿瘤患者、1...; 王文丽曹阳成树贞; 文献传递

8-Br-cAMP与槲皮素联合应用对人食管癌Eca-109细胞逆转化作用的研究: 目的探讨8-Br-cAMP与槲皮素联合用药对人食管癌Eca-109细胞逆转化的作用.方法将培养的Eca-109细胞随机分为四组:①8-Br-cAMP组（Br）:加终浓度为2×10-5-mol/L8-Br-cAl4P:②槲...; 宫璀璀王文丽吴景兰刘影; 关键词：PCNA 抑癌基因槲皮素 ECA-109细胞; 文献传递

人sCR1克隆、真核和原核表达纯化及其多克隆抗体制备: 2008年; 目的:原核表达人sCR1分子胞外区及其多克隆抗体制备。方法:提取人总RNA进行RT-PCR扩增合成cDNA,以cDNA为模板,构建重组表达质粒pET28 a-sCR1。转化大肠杆菌中,用IPTG诱导表达重组人sCR1融合蛋白,将其作为免疫原制备兔多抗。采用ELISA法检测抗体效价,经免疫亲和层析法纯化后,进行SDS-PAGE鉴定分析。结果:在原核细胞中高效表达人sCR1融合蛋白,经纯化复性后作为免疫原,免疫家兔,获得了高效价及特异性的兔抗人sCR1多克隆抗体,可特异地识别人sCR1蛋白。结论:纯化复性后的sCR1融合蛋白作为抗原免疫家兔,有较好的抗原性和免疫原性,成功地制备出兔抗人sCR1多克隆抗体,为进一步大量表达纯化人sCR1融合蛋白与临床免疫学检测方法的建立,也为深入研究sCR1生物学功能奠定了基础。; 王广兰宫璀璀刘亚利张长远刘珊王文丽戴启宇; 关键词：原核表达多克隆抗体补体受体1型

王文丽