梅亚波
- 作品数：9 被引量：32H指数：4
- 供职机构：南方医科大学珠江医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划科技部科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人冠状病毒229E、OC43与SARS-CoV血清学相关性的研究被引量：5
- 2006年
- 目的检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒(229E、OC43和SARS-CoV)特异性抗体,分析3种冠状病毒血清学相关性。方法采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OC43和SARS-CoV 3种冠状病毒核衣壳(N)蛋白抗体。结果用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98％、100％和1％,34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100％;免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97％、99％和2％,34例SARS患者恢复期血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97%、100％和100%;11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中,免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高,10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高,ELISA检测2例出现229E N蛋白IgG滴度4倍以上升高,没有一例出现OCA3 N蛋白抗体滴度升高。结论正常人群中普遍存在229E和OC43两种人冠状病毒抗体,SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OC43血清学交叉反应,提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原,结果对研究SARS溯源有重要意义。
- 王压娣丘立文廖志勇梅亚波车小燕
- 关键词：冠状病毒SARS-COV血清学
- SARS-CoV核衣壳蛋白用于SARS血清学诊断的研究被引量：4
- 2005年
- 目的 研究SARS患者血清中抗SARS冠状病毒 (SARS CoV)核衣壳 (N)蛋白特异性抗体的产生规律 ,评价N蛋白在SARS诊断中的作用。方法 采用间接ELISA法测定 2 5 0例临床确诊、1 88例临床疑似、6 2例临床排除SARS患者血清中针对N蛋白IgG抗体 ,并与其SARS CoVIgG总抗体水平进行比较。结果 临床确诊病例针对N蛋白和全病毒特异性抗体IgG的阳性率均随着病程的延长而增高。N IgG在发病第 1周检出阳性率为 3.4 5 %(4 1 1 6 ) ,第 2周为 6 1 .76 %(42 6 8) ,第 3周为81 .82 %(1 8 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;SARS CoVIgG第 1周检出阳性率为 4 .31 %(5 1 1 6 ) ,第 2周为 5 5 .88%(38 6 8) ,第 3周为 77.2 7%(1 7 2 2 ) ,2 2～ 93d达到 1 0 0 %(44 4 4) ;临床疑似病例N IgG检出阳性率为 3.1 9%(6 1 88) ,SARS CoVIgG检出阳性率为 2 .6 6 %(5 1 88) ;临床排除病例N IgG和SARS CoVIgG检出阳性率均为 6 .4 5 %(4 6 2 )。两种方法检测阳性率差异无统计学意义 (χ2 =0 .1 80 ,P <0 .0 0 1 ) ;两者之间符合率为 98.2 0 %(491 5 0 0 ) ,正常人群SARS CoVN IgG阳性率为 1 .88%(1 4 74 5 )。结论 SARS CoVN重组蛋白对于SARS诊断试剂的研究具有重要价值。
- 王压娣郝卫廖志勇梅亚波尹锴车小燕
- 关键词：血清学诊断核衣壳蛋白间接ELISA法SARS患者抗体IGG病毒特异性
- SARS-CoV S蛋白S1区克隆、血清学研究及其单克隆抗体制备
- 严重急性呼吸综合征/(Severe acute respiratory syndrome,SARS/)是一种新出现的突发性传染性疾病,其病原体为新型冠状病毒,命名为SARS相关冠状病毒/(SARS-associated ...
- 梅亚波
- 关键词：严重急性呼吸综合征刺突蛋白核壳蛋白单克隆抗体血清学
- 文献传递
- SARS-CoV、229E和OC43的抗原相关性研究被引量：4
- 2006年
- 目的:分析SARS冠状病毒(SARSCoV)和人冠状病毒(229E和OC43)的抗原相关性。方法:制备三株冠状病毒的免疫兔血清及其重组核衣壳(N)蛋白的免疫小鼠血清,分别采用ELISA法、Westernblot和免疫荧光法对免疫血清进行检测以分析三株冠状病毒的抗原相关性。结果:Westernblot结果显示重组N蛋白免疫小鼠血清仅与各自的冠状病毒或重组N蛋白有特异性反应,相互间无交叉反应,而ELISA结果显示OC43重组N蛋白免疫小鼠血清与SARSCoV、229EN蛋白出现了构象抗体的交叉反应。同时,免疫荧光结果显示SARSCoV和OC43免疫兔血清与229E感染细胞存在较明显的交叉反应,但在ELISA、Westernblot结果中全病毒免疫兔血清均仅与各自N蛋白特异性反应,相互间无交叉反应。结论:SARSCoV、229E和OC43N蛋白抗原性在免疫动物血清中不存在交叉反应,而SARSCoV、OC43全病毒免疫血清均和229E出现明显的交叉反应。另外,基因重组的OC43N蛋白与另外二种N蛋白出现重组构形表位的交叉反应,提示以基因重组的蛋白作为诊断试剂,可能会因为蛋白的空间构象发生改变而产生非特异性反应。
- 丘立文王压娣廖志勇梅亚波车小燕
- 关键词：冠状病毒核衣壳蛋白免疫血清抗原性
- 严重急性呼吸综合征患者核壳蛋白和刺突蛋白S1区的特异性抗体研究被引量：3
- 2005年
- 目的 研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中抗SARS冠状病毒(SARS CoV)核壳蛋白(N)及刺突蛋白(S)S1区特异性抗体的产生规律,评价这两种蛋白在SARS诊断研究中的作用。方法 采用ELISA法检测86例确诊SARS患者血清中针对N和S1蛋白IgG(N- IgG和S1 -IgG),并与SARS- CoVIgG水平进行比较。结果 两种蛋白的特异性抗体的阳性率均随着病程的延长而增高。N -IgG在发病第1周检出阳性率为14% (6 /44),第2周为56% (10 /18),第3周达到100% (24 /24);S1- IgG第1周检出阳性率为5% ( 2 /44 ),第2周为39% ( 7 /18 ),第3周阳性率达到83% ( 20 /24)。两种蛋白抗体的检测结果分别与SARS- CoVIgG结果比较,检测符合率分别为88% (76 /86)和83% (71 /86 )。结合免疫印迹和ELISA两种方法检出正常人群SARS CoVN -IgG阳性率为1. 88%(14 /745)。结论 SARS -CoVN和S1重组蛋白对于SARS诊断试剂的研究具有重要价值。
- 梅亚波王压娣廖志勇郝卫车小燕
- 关键词：SAPS刺突蛋白核壳蛋白确诊
- SARS冠状病毒刺突蛋白的研究进展被引量：1
- 2005年
- SARS冠状病毒S蛋白是病毒颗粒最大的结构蛋白和最重要的表面抗原。该蛋白在介导病毒颗粒与宿主细胞受体结合、融合的过程中起着关键作用。它是病毒中和性抗体的靶点,在疫苗研究和抗病毒治疗研究中均占有重要地位。本文就SARS流行以来有关S蛋白的研究作一综述。
- 梅亚波车小燕
- 关键词：SARS冠状病毒刺突蛋白
- 重组SARS冠状病毒棘突蛋白S1区基因片段的克隆、表达及免疫原性研究被引量：2
- 2005年
- 目的构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)棘突(spike)蛋白(S蛋白)S1区基因(40～2001bp)分段表达载体,并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增S1区基因,将其定向插入pQE30质粒,在pQE30质粒上将S1切成3段(40～751、746～1344、746～2001bp),均插入pQE30质粒,构建质粒在大肠埃希菌M15中表达,表达产物经亲和层析纯化及WesternBlot和ELISA鉴定。结果构建的3种重组质粒(pQE30/S1a、pQE30/S1b、pQE30/S1c)均高效表达,重组蛋白相对分子质量分别为26700、22500和46000,表达量分别占菌体总蛋白质的35%、35%和30%。3种重组蛋白经Ni亲和层析树脂得到成功纯化。经Western-Blot及ELISA证实,重组蛋白片段S1c(746～2001bp)可以被SARS患者血清所识别。结论成功构建了SARS-CoVS蛋白S1区基因分段表达载体,重组蛋白S1c具有较强的免疫原性,它的获得为下一步疫苗的研制奠定了基础。
- 梅亚波廖志勇王压娣张丽娅徐华Yuen Kwok Yung车小燕
- 关键词：冠状病毒属蛋白质SSARS冠状病毒免疫原性研究基因片段S蛋白
- 抗SARS冠状病毒S1蛋白N端249至667的单克隆抗体的制备与鉴定(英文)被引量：14
- 2004年
- 目的在获得了具有免疫原性的SARS冠状病毒S1蛋白片段的基础上,制备和鉴定特异性抗该段S1蛋白单克隆抗体(mAb)。方法原核表达含S蛋白受体结合区的SARS冠状病毒S1蛋白片段S1c(N端249-667氨基酸残基),其免疫原性经SARS病人恢复期血清鉴定后免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备单克隆抗体,并采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定。结果筛选出3株特异性针对SARS冠状病毒S1蛋白N端249-667的mAb杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定1株为IgG1,2株为IgG2a,经免疫荧光鉴定与人冠状病毒株229E和OC43无交叉反应。结论获得3株抗SARS冠状病毒S蛋白受体结合区特异性单克隆抗体,为建立新的SARS冠状病毒检测方法的和进一步研究S蛋白的功能奠定了基础。
- 温坤梅亚波丘立文廖志勇袁国勇车小燕
- 关键词：严重急性呼吸综合症传染性非典型肺炎冠状病毒S1蛋白单克隆抗体
- SARS-CoV、HCoV-229E和OC43核衣壳蛋白的克隆表达及抗原相关性分析被引量：4
- 2005年
- 目的克隆表达SARS冠状病毒(SARS-CoV)和人冠状病毒(HCoV-229E、HCoV-OC43)核衣壳(N)蛋白,并对其重组蛋白的抗原相关性进行探讨。方法RT-PCR扩增SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43的N基因全长序列,克隆到原核表达载体pQE30,IPTG诱导表达重组蛋白,用Westernblot和免疫荧光鉴定。结果获得SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43His-N融合蛋白的相对分子质量(Mr)分别约为47×103、44×103、50×103,与相应预测值相符,Westernblot和免疫荧光证实,3种融合蛋白仅与相应的免疫血清特异性结合,3种蛋白的抗原性相互间无交叉反应。结论获得具有免疫原性的SARS-CoV、HCoV-229E和HCoV-OC43的核衣壳融合蛋白,其3种N蛋白抗原性在免疫动物血清中不存在交叉反应。
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- 关键词：冠状病毒核衣壳蛋白抗原性核衣壳蛋白克隆表达RT-PCR扩增
