王晨燕
- 作品数:119 被引量:99H指数:6
- 供职机构:福建省农业科学院更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金福建省属公益类科研院所基本科研专项福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 用于鉴别猪圆环病毒1、2、3型的引物组及其应用
- 本发明提供用于鉴别猪圆环病毒1、2、3型的引物组及其应用,所述引物组序列如SEQ ID NO.1‑4所示。本发明基于猪圆环病毒3种基因型(PCV1、PCV2和PCV3)的基因组结构特点,选择猪圆环病毒3种基因型(PCV1...
- 陈如敬陈秋勇吴学敏王晨燕周伦江严山车勇良王隆柏魏宏刘玉涛
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- 表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体
- 本发明属于分子生物学领域,具体涉及一种表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体。通过PEDV的M和N基因片段,利用Blunt‑M2表达载体,通过无缝克隆技术,构建出表达PEDV的M+N双基因的真核表达载体,并在工程细胞中...
- 王隆柏周伦江吴学敏陈秋勇王晨燕车勇良刘玉涛
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- 变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)S和N融合双基因质粒的构建及鉴定被引量:3
- 2018年
- 为构建变异猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和N融合双基因质粒并表达出相应的蛋白,通过扩增变异PEDV的S和N基因,将S基因连接到pEAS-Blunt M2(M2)真核表达载体,构建M2-S质粒,通过同源重组原理,采用无缝拼接试剂盒将N基因克隆至M2-S基因片段,再转化到Trans1-T1感受态细胞中,构建M2-S-N融合双基因质粒。将M2-S-N融合双基因质粒转染到293T细胞,可表达出相应的S-N融合双基因蛋白。利用RT-PCR、Western blot技术和免疫BLAB/c鼠试验鉴定载体及蛋白表达的免疫活性,结果成功构建了M2-S-N融合双基因质粒,并表达出具有免疫原性的S-N融合双基因蛋白,且该蛋白能够诱导小鼠产生特异性抗体。变异PEDV的S和N基因融合双基因质粒的构建,为进一步开展变异PEDV的诊断技术及基因工程疫苗等研究奠定良好基础。
- 王隆柏王晨燕吴学敏陈秋勇车勇良周伦江
- 关键词:S基因N基因
- 应用双向电泳分析2株不同毒力的副猪嗜血杆菌蛋白质表达的差异被引量:1
- 2015年
- 副猪嗜血杆菌是猪常见细菌性疾病的病原之一,临床表现为多发性纤维素性浆膜炎、关节炎和脑膜炎。运用蛋白质组学技术对不同毒力的副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)进行比较研究,明确差异蛋白质信息,对揭示其致病机制具有重要意义。本试验通过应用建立的双向电泳方法对选取同为4型的2株不同H.parasuis临床分离株(菌株A和菌株B)进行蛋白质组学研究,二者相互比较,共鉴定出10个差异表达蛋白质,其中菌株A有3个蛋白质表达量为增加,分别是谷氨酰tRNA合成酶、半胱氨酸合成酶和假设蛋白;菌株B有7个蛋白质表达量为增加,包括Yae T蛋白(omp85)、CTP合酶、天冬氨酰tRNA合成酶(有3个)、尿苷激酶、SecB蛋白。差异蛋白质的功能主要集中在蛋白质合成、氨基酸合成和嘧啶合成。研究结果进一步丰富了H.parasuis的毒力因子和致病机制的相关信息,也为今后开展H.parasuis免疫蛋白质组学研究奠定了基础。
- 王晨燕王隆柏车勇良吴学敏陈如敬邵良平周伦江
- 关键词:副猪嗜血杆菌双向电泳差异蛋白质
- 一种抗PEDV的单克隆抗体及其化学发光方法检测方法
- 本发明提供一种抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)的单克隆抗体及化学发光检测方法,从猪流行性腹泻‑猪传染性胃肠炎‑轮状病毒的三联弱毒疫苗中纯化获得PEDV毒株,作为制备PEDV单克隆抗体的抗原;通过病毒培养、免疫Balb/c小...
- 王隆柏周伦江王晨燕吴学敏陈如敬车勇良刘玉涛
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- 猪伪狂犬病毒免疫相关基因的遗传进化分析
- 2012年以来,中国多地免疫伪狂犬基因缺失苗的猪场爆发伪狂犬病.为了解新流行PRVFJ-2015株的主要免疫相关基因序列遗传进化情况,本研究参照GenBank已公布的PRV全基因序列设计了4对特异性扩增引物,并将扩增片段...
- 陈秋勇吴学敏王隆柏陈如敬车勇良王晨燕刘玉涛严山周伦江
- 关键词:伪狂犬病流行毒株免疫相关基因遗传进化免疫逃逸
- 用于检测经典型和变异型猪伪狂犬病毒的实时荧光PCR-HRM引物
- 本发明涉及一组用于检测经典型猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)和变异型猪伪狂犬病毒的引物,属于动物传染学领域。该引物根据经典型PRV和变异型PRV在gE基因上的差异设计,由于变异型PRV和经典型...
- 陈如敬吴学敏周伦江陈秋勇车勇良严山王晨燕王隆柏魏宏刘玉涛
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- 福建省猪流行性腹泻流行病学调查被引量:6
- 2014年
- 为探求2012—2013年猪流行性腹泻病毒(PEDV)在福建省的流行情况,本研究采用RT-PCR方法对采自福建省125个规模猪场的257份发生腹泻病料进行PED病原检测,并分析PEDV致猪群的发病情况。结果表明:被检病料PEDV的阳性率为63.04%(162/257),能导致不同阶段猪群发病,尤其是哺乳仔猪的发病率最严重,死亡率高达100%。表明:PEDV在福建省发病仍较为严重,应加强防控,以减少损失。
- 林裕胜王隆柏吴秋玉王晨燕邵良平周伦江
- 关键词:猪流行性腹泻流行病学
- 鉴别猪圆环病毒3型两个基因亚型的实时荧光定量PCR-HRM引物
- 本发明涉及一组用于检测猪圆环病毒3型两个基因亚型的PCR‑HRM引物,属于动物传染病学领域。基于Cap蛋白的遗传进化显示,PCV3进一步划分为2个基因亚型(G1基因型和G2基因型),进一步分析发现,PCV3‑G1和PCV...
- 陈如敬陈秋勇吴学敏王晨燕周伦江严山车勇良王隆柏魏宏刘玉涛
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- 鸡传染性喉气管炎病毒WF03株关键抗原基因和毒力基因的遗传演化与致病性分析
- 2023年
- 本研究旨在分析近年分离自鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)活疫苗免疫失败鸡群的ILTV WF03株的部分关键抗原基因及毒力基因的变异情况和对鸡的致病力,为ILTV活疫苗的有效性评价提供一个稳定、可靠的攻毒毒株。通过ILTV临床分离株WF03的部分免疫原性基因和毒力相关基因进行克隆和测序,并与疫苗株和早期分离株进行遗传进化分析,同时在28和56日龄SPF鸡测定了该毒株的致病力。遗传进化分析结果表明:WF03株主要免疫原性基因和毒力相关基因与我国早期的分离株和现在部分商品化的疫苗株处在同一个大的进化分支,亲缘关系较近。致病力试验显示WF03株以10^(4.5)、10^(4).0、10^(3.5)和10^(3.0)EID_(50)·羽^(-1)的剂量感染28日龄SPF鸡后发病率分别为100%、100%、95%和85%,死亡率分别为45%、30%、35%和10%;以10^(4).0 EID_(50)·羽^(-1)的剂量感染56日龄SPF鸡的发病率和死亡率分别为100%和27.3%;所有发病鸡临床症状主要表现为咳血、呼吸困难、张口呼吸等典型的喉气管炎发病症状。结果表明:ILTV临床分离株WF03主要抗原基因和毒力基因与我国早期分离株和疫苗株相比未发生明显变异,属于强致病力毒株,其对SPF鸡的发病能力稳定,在10^(4.5)、10^(4).0、10^(3.5)和10^(3.0)EID_(50)·羽^(-1)攻毒剂量时均可以使80%以上的鸡发病。结果提示目前我国鸡群中存在着强致病力ILTV毒株流行,且WF03株可以作为疫苗效力评价的攻毒毒株,这将丰富我国当前ILTV毒株的流行病学数据库。
- 张翼王晨燕杨骁邵国青邵国青
- 关键词:传染性喉气管炎病毒致病力