陈丽
- 作品数：19 被引量：42H指数：4
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- 含GDNF基因真核载体的构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
- 2015年
- 目的构建含GDNF基因真核表达载体,并分析其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达。方法从SD大鼠脑中提取总RNA,采用逆转录PCR法扩增GDNF基因,测序鉴定后将GDNF基因克隆入p CDNA3.1中,构建真核表达载体p CDNA3.1-GDNF;原代培养大鼠间充质干细胞,以脂质体介导法将构建好的真核表达载体p CDNA3.1-GDNF转染至间充质干细胞;RT-PCR、细胞免疫荧光、Western blot检测GDNF在间充质干细胞中的表达。结果扩增的大鼠GDNF基因序列与Gen Bbank的参考序列完全一致,GDNF基因已经正确克隆到真核表达载体p CDNA3.1中;转染骨髓间充质干细胞4 h后,GDNF的mRNA和蛋白能在细胞中正确表达。结论 p CDNA3.1-GDNF真核表达载体构建成功,并能在大鼠间充质干细胞中正确表达,这为下一步研究携带GDNF的骨髓间充质干细胞治疗癫痫奠定了实验基础。
- 马猛陈丽赵元淑邓镇王林杰冯雷罗亚楠雷水生朱晓琴
- 关键词：GDNF骨髓间充质干细胞癫痫
- 二乙基亚硝胺对肝脏过表达miR-155转基因小鼠肝癌发生的影响被引量：1
- 2019年
- 目的建立诱发性肝癌模型,观察miR-155转基因小鼠肝癌发生情况及相关基因表达变化。方法制备Rm155LG转基因小鼠,并行可视化筛选和PCR验证。利用小动物活体成像仪筛选Rm155LG/Cre双转基因小鼠,并通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-155转基因在Rm155LG/Cre双转基因小鼠肝脏中的表达。分别对Rm155LG/Cre双转基因小鼠和同窝对照小鼠腹腔注射二乙基亚硝胺(DEN),6个月后取材行肝脏大体形态观察,并通过Western-blot分析肝癌相关基因的表达变化。结果 Luc和miR-155转基因在Rm155LG/Cre双转基因小鼠的肝脏上成功被激活。腹腔注射DEN后,与同窝对照小鼠相比,Rm155LG/Cre双转基因小鼠肝脏癌结节增多,肝癌相关基因表达上调。结论在Rm155LG/Cre双转基因小鼠上实现了miR-155转基因的肝脏特异激活,并且利用Rm155LG/Cre双转基因小鼠,初步证明了miR-155对DEN诱导的小鼠肝癌的发生有促进作用,这为后续研究miR-155在肝癌发生发展和转移中的作用奠定了坚实的基础。
- 陈丽林霞关燕红林晓琳肖东杜弢
- 关键词：肝癌MIR-155CRE/LOXP系统转基因小鼠二乙基亚硝胺
- 乙酰唑胺对戊四氮致慢性癫痫大鼠海马水通道蛋白4表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的观察乙酰唑胺(acetazolamide,AZA)对戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)致慢性癫痫大鼠发作及海马水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)表达的影响,探讨其抗癫痫的可能机制。方法将实验大鼠随机分为4组:对照组(每日腹腔注射生理盐水)、致痫组[每日腹腔注射亚惊厥剂量PTZ 35mg/(kg·d)建立慢性癫痫大鼠模型]、乙酰唑胺干预组[每日先腹腔注射AZA 35mg/(kg·d)预处理,30min后再腹腔注射亚惊厥剂量PTZ]和乙酰唑胺对照组[每日单纯腹腔注射AZA]。各组采用以上注射方式连续给药28d,每次注射后1h内记录各组大鼠癫痫发作级别,统计各组每天平均发作级别,观察乙酰唑胺对大鼠慢性癫痫发作的影响;最后1次给药1d后,脑电图记录各组大鼠脑电的改变,免疫组化观察AQP4在海马内分布,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测AQP4mRNA和蛋白的表达。结果对照组和乙酰唑胺对照组无明显癫痫发作,乙酰唑胺干预组潜伏期为(23.5±2.4)d,而致痫组潜伏期为(18.2±1.7)d,乙酰唑胺干预可明显延长慢性癫痫大鼠点燃的潜伏期(P<0.05);脑电图结果对照组和乙酰唑胺对照组无明显痫样波,致痫组记录到棘波、尖波等痫样波,而乙酰唑胺干预组痫样波明显减弱;免疫组化结果显示:AQP4主要分布在海马CA3区血管周围;RT-qPCR和Western blot结果显示慢性致痫组AQP4 mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01),乙酰唑胺干预组AQP4表达降低但仍高于对照组(P<0.05),乙酰唑胺对照组AQP4表达较对照组明显降低(P<0.05)。结论乙酰唑胺能够抑制癫痫的发作,延长慢性点燃潜伏期,并且抑制AQP4的表达,其作用机制可能是与乙酰唑胺抑制AQP4表达,改善慢性癫痫状态下脑内水和离子平衡有关。
- 陈丽余涵周玉波马猛王林杰胡景鑫雷水生朱晓琴
- 关键词：慢性癫痫水通道蛋白4乙酰唑胺戊四氮
- 小鼠组织特异性高表达miR-155对血糖调节的作用及机制
- 背景和目的： 糖尿病是一种遗传和环境因素共同作用而形成的多基因遗传性复杂疾病，并且会导致许多严重的并发症如终末期肾脏病、心血管疾病、失明和截肢。但糖尿病的发病机制尚未完全阐明。目前，全世界的糖尿病患病率迅速增加，发展中...
- 陈丽
- 关键词：糖尿病血糖调节MIR-155胰岛素敏感性
- 危重型EV71型手足口病发生的危险因素调查及护理对策被引量：8
- 2019年
- 目的探讨危重型EV71型手足口病发生的危险因素,提出相应的护理对策,为临床诊治及护理提供参考。方法选取2013年12月至2017年12月我院儿科收治的595例EV71型手足口病患儿,其中非危重型557例患儿作为非危重组,危重型38例患儿作为危重组,分析危重型患儿的危险因素并制定护理对策。结果多因素logistic回归分析显示不典型皮疹、心率异常、有肢体震颤、有嗜睡萎靡、胸片异常、血糖升高是危重型EV71型手足口病发生的独立危险因素(P<0.05)。结论对于EV71型手足口病患儿,如存在不典型皮疹、心率及胸片异常、神经系统异常症状、血糖升高,提示患儿病情有进展为危重型,应尽早针对以上危险因素给予干预性护理,以改善患儿预后。
- 甘美英黄文影刘雪萍曾翠文曾艳青邓惠燕陈丽
- 关键词：手足口病危重型回顾性调查护理
- 一例重症社区获得性肺炎的临床护理体会
- 2022年
- 重症肺炎是一种由于肺组织(细支气管、肺泡、间质)炎症发展至一定程度恶化加重导致的疾病,可引起器官功能障碍甚至危及患者生命。重症肺炎患者具有病情危重、并发症多、死亡风险高、各器官均可受累等特点,如果未在早期阶段进行及时有效的诊治,可导致呼吸衰竭,对患者的健康造成严重威胁。对患者采取有效的护理干预措施能够减少并发症发生风险,促进其恢复。我院2021年3月10日收治1名重症肺炎患儿,存在发热、呼吸困难、气促等症状,入院采取无创呼吸机辅助通气,同时给予抗感染、化痰、气道雾化等处理,呼吸困难好转。具体报道如下。
- 何远媚陈丽黄文影
- 关键词：重症肺炎抗病毒护理
- TGF-β_1对人输尿管平滑肌细胞增殖和迁移及α-SMA表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30μmol/L SB-431542处理);4TGF-β_1+TGF-β_1拮抗剂组(10μg/L TGF-β_1+30μmol/L SB-431542处理)。MTT法检测各组输尿管平滑肌细胞在处理0、24、48、72h的增殖情况;细胞划痕实验检测各组输尿管平滑肌细胞处理24h、48h时的迁移能力;各组细胞处理48h后分别应用RT-qPCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果MTT实验显示与对照组相比,TGF-β_1处理24h后USMCs增殖率增加(P<0.05),处理48h、72h后增殖最明显(P<0.01),拮抗剂组细胞生长明显受抑制(P<0.05或P<0.01),TGF-β_1联合SB-431542共同处理细胞后其增殖活性与对照组相比无明显差异;细胞划痕实验显示TGF-β_1组与对照组相比,各时间点细胞迁移距离明显增加(P<0.01),拮抗剂组24h和48h细胞迁移距离与对照组相比明显减小(P<0.01),TGF-β_1联合拮抗剂处理组迁移距离与对照组相比差异无统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比,经TGF-β_1处理组α-SMA mRNA和蛋白的表达明显增加(均P<0.01),TGF-β_1拮抗剂则明显下调α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 TGF-β_1能够明显上调输尿管平滑肌细胞中α-SMA mRNA和蛋白的表达,并能增强细胞增殖和迁移的生物活性,拮抗TGF-β_1信号路径可明显对α-SMA的表达及细胞增殖和迁移产生抑制效应。
- 徐桂彬余涵陈丽罗亚楠马猛王林杰何永忠彭晔李逊朱晓琴
- 关键词：Α-平滑肌肌动蛋白迁移
- 利用高压水枪法将双报告基因导入小鼠肝脏
- 2016年
- 目的:通过高压水枪法将双报告基因[即绿色荧光蛋白(GFP)和萤火虫荧光素酶(Luc)]导入小鼠肝脏,以熟练掌握高压水枪法,其将为后续相关研究奠定方法学基础。方法:将质粒pcEF.luc-IRES-GFP瞬时转染入人肝癌细胞SMMC-7721以进行载体体外功能验证,并利用高压水枪法将质粒pcEF.luc-IRES-GFP经尾静脉注射入小鼠肝脏内,经小动物活体成像系统活体检测GFP和Luc信号,同时免疫组化检测GFP在肝组织中的表达情况。结果:瞬转结果显示,7721细胞上可检测到GFP和Luc表达;利用高压水枪法将pcEF.luc-IRES-GFP导入小鼠肝脏后,利用小动物活体成像仪成功在肝内检测到GFP和Luc信号;免疫组化结果显示部分肝细胞表达GFP。结论:成功掌握了将目的基因导入小鼠肝脏的高压水枪法,这为相关后续研究打下良好基础。
- 贾俊双林霞罗冰敏陈丽刘宇肖东林晓琳
- 关键词：尾静脉肝脏
- NR2A抑制剂通过调控AQP4的表达抑制癫痫发作的研究
- 目的： 癫痫（Epilepsy, EP）是神经系统常见疾病之一。癫痫发病机制至今仍不明确，这无疑给其治疗带来极大困惑，因此寻找新的靶点治疗癫痫仍是当今神经科学研究者急需解决的问题。本课题组前期研究发现，N-甲基-D-天...
- 陈丽
- 关键词：癫痫脑水肿水通道蛋白4
- 大鼠GAD65基因慢病毒载体的构建及其在MSCs中的表达被引量：1
- 2015年
- 目的构建谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase 65,GAD65)重组慢病毒表达载体,感染间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)并进行鉴定。方法 PCR法扩增GAD65基因,构建LV5-GFP-GAD65慢病毒载体;与包装质粒共转染293T细胞包装病毒;将慢病毒感染大鼠MSCs,荧光显微镜鉴定转染率,Western blot检测GAD65的表达。结果双酶切及测序结果表明LV5-GFP-GAD65慢病毒载体构建成功;包装病毒产生的病毒液滴度为5×107TU/ml;慢病毒感染大鼠MSCs的转染率高于90%,Western blot结果显示GAD65蛋白表达比对照组明显升高。结论 GAD65重组慢病毒载体构建成功,包装得到高浓度病毒液,感染大鼠MSCs能稳定过表达GAD65蛋白,为进一步探索侧脑室注射基因化的MSCs治疗癫痫奠定实验基础。
- 赵元淑邓镇陈丽周玉波马猛罗亚楠胡景鑫雷水生朱晓琴
- 关键词：慢病毒GAD65间充质干细胞癫痫
