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杜智敏
作品数:
1
被引量:3
H指数:1
供职机构:
哈尔滨医科大学附属第二医院
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发文基金:
国家教育部博士点基金
黑龙江省博士后科研启动基金
国家自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
贺军
哈尔滨医科大学基础医学院生物化...
霍亚丽
哈尔滨医科大学基础医学院生物化...
张赫
哈尔滨医科大学基础医学院生物化...
徐亚
哈尔滨医科大学基础医学院生物化...
马宁
哈尔滨医科大学基础医学院生物化...
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限制性内切酶
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作者
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王大勇
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霍亚丽
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杜智敏
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中国生物化学...
年份
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2016
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限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠
被引量:3
2016年
CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。
高旭
马宁
王大勇
张赫
张艳芬
徐亚
贺军
徐书会
霍亚丽
杜智敏
关键词:
纯合子
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