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徐宏伟: 作品数：10 被引量：13H指数：2; 供职机构：塔里木大学生命科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金新疆生产建设兵团博士基金塔里木大学校长基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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棉酚对新疆多浪羊IFN-γ基因表达影响及pcDNA3.1-IFN-γ真核表达载体的构建和淋巴细胞转染: 棉酚，又名棉毒素或者棉籽饼，是棉属植物内形成的一种多酚类化合物存在于植株各部分的褐色点状色素腺体中，而棉籽饼粕确是一种产量大，价格低廉，富含蛋白质的动物饲料，可就是因为棉酚的毒性限制了这种优良饲料的大规模的应用。无论是对...; 徐宏伟; 关键词：棉酚 IFN-Γ 外周血淋巴细胞转染; 文献传递

棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法: 本发明涉及一种棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法，属于生物技术领域。其具体方法和步骤如下：(1)分离和培养淋巴细胞；(2)提取总RNA；(3)合成cDNA；(4)cDNA的纯化；(5)设计引物；(6...; 李莲瑞王娟娟潘伊微贾山岭徐宏伟曾国航李玮; 文献传递

多浪羊IL-1β基因的克隆及序列分析被引量：5: 2013年; 【目的】进行多浪羊IL-1β基因的克隆及序列分析,为多浪羊IL-1β的功能研究及多浪羊免疫应答基因的筛选奠定基础。【方法】根据GenBank中NM_001009465.2的mRNA序列设计引物,以新疆多浪羊淋巴细胞的总RNA为模板,用RT-PCR扩增多浪羊IL-1β基因序列。【结果】IL-1β基因序列包含了一个862 bp的开放阅读框,成熟蛋白编码的氨基酸序列长度为286个氨基酸。通过IL-1-β核苷酸多序列比对发现,第70、163、180、269位上四个相对保守的碱基处出现了四个突变;通过IL-1-β氨基酸多序列比对,第24、36位上两个氨基酸发生突变。通过GenBank中的Blastn序列比较分析,多浪羊的IL-1β基因与普通绵羊的同源性高达99%。【结论】在进化树体系中,多浪羊与反刍动物集成一束,它们与其它哺乳动物源于共同的祖先,但分别处于进化树上不同的分支。; 曾国航曹玉华王娟娟潘伊微贾山玲徐宏伟李莲瑞; 关键词：多浪羊 IL-1Β 基因克隆核苷酸序列分析

米氏硫胺素芽孢杆菌的分离及鉴定被引量：2: 2016年; 【目的】分离、纯化土壤中的细菌,通过鉴定得到米氏硫胺素芽孢杆菌。【方法】通过生化鉴定、提取细菌基因组并进行细菌16 s rDNA测序等方法鉴定。【结果】此细菌生化鉴定结果符合《常见细菌鉴定手册》中的关于米氏硫胺素芽孢杆菌的生化鉴定,将细菌的16 s rDNA测序结果在NCBI上进行比对,表明该细菌为米氏硫胺素芽孢杆菌。【结论】分离、纯化得到的细菌经测序对比后确定是米氏硫胺素芽孢杆菌。; 张晶徐宏伟曾国航宋显明艾东旭李莲瑞; 关键词：细菌分离细菌鉴定 RDNA

一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法: 本发明涉及一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法，属于生物技术领域。具体构建方法及过程如下：(1)提取和纯化总RNA；(2)合成cDNA第一链；(3)合成cDNA第二链；(4)对产物进行消化、酶切、过柱分离及...; 李莲瑞潘伊微贾山岭王娟娟曾国航徐宏伟李玮; 文献传递

新疆多浪羊IL-1β基因地高辛探针的标记和敏感性检测: 2015年; 【目的】IL-1β是一种多效的促炎因子,在细胞因子炎性反应中为重要介质,处于介导炎性反应的重要因子,在造血和免疫活性中都发挥重要的作用。该实验结果为进一步研究绵羊分子免疫学,从多浪羊外周血淋巴细胞c DNA文库的筛选基因,寻找与IL-1β相关的新基因奠定基础。【方法】将构建好的多浪羊的p MD-18T-IL-1β质粒[1]进行PCR扩增,经过切胶回收,目的基因的浓缩后,采用罗氏地高辛标记和检测试剂盒标记IL-1β基因,获得IL-1β地高辛探针,进行敏感性检测,在Hybond N+膜上显影,计算探针浓度。【结果】计算出标记后的探针浓度为17.1 g/m L。【结论】通过southern杂交可以得知,Hybond N+膜上有IL-1β基因的双链DNA,标准杂交液中为DIG标记的IL-1β基因单链DNA,通过避光显色,在Hybond N+膜有深紫色的杂交条带,证明探针的浓度达到标准浓度。; 曾国航徐宏伟潘伊微贾山岭曹玉华李莲瑞; 关键词：地高辛

一株β-溶血菌的鉴定被引量：2: 2015年; 旨在通过细菌16SrRNA鉴定分离得到的一株β-溶血细菌(B1)。提取菌株B1的基因组DNA,利用细菌16SrRNA的通用引物扩增B1菌株的16SrRNA,测序并对序列进行比对分析。结果成功扩增出B1菌株的16SrRNA,条带很亮且无杂带,阴性对照无条带,条带大小为1 499bp,符合16SrRNA 1 500bp的要求;利用NCBI数据库的Blast工具进行核酸比对,结果显示B1菌株与Aneurinibacillus migulanus菌的16S rRNA序列的一致性在99%以上,通过进化树分析可知,B1与Aneurinibacillus migulanus strain A72,Aneurinibacillus migulanus strain ATCC 9999这2种菌株的亲缘关系最近,可以确定B1菌株为短芽孢菌属的Aneurinibacillus migulanus。; 徐宏伟李慧张丽娜李莲瑞; 关键词：细菌鉴定 RRNA

新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测被引量：2: 2016年; 为获得多浪羊IFN-γ地高辛探针,并对其标记效率进行检测。将多浪羊pMD-18T-IFN-γ克隆菌进行PCR扩增,经切胶回收及目的基因浓缩后获得目的基因IFN-γ,然后用地高辛标记和检测试剂盒对IFN-γ基因进行标记,获得IFN-γ地高辛探针。IFN-γ的PCR扩增产物经8g/L琼脂糖电泳分离后转移至Hybond N+膜,膜上显影后进行敏感性检测并计算探针质量浓度,结果显示,IFN-γ地高辛探针在杂交液中的质量浓度为30μg/L。Southern杂交显示,Hybond N+膜上有IFN-γ基因的双链DNA,且浓缩后的DNA(2.5μg)标记的特异性探针质量浓度较高,可以在Hybond N+膜上呈现出清晰的杂交条带,证明获得的探针质量浓度符合要求。; 艾东旭徐宏伟李玮张晶宋显明李莲瑞; 关键词：多浪羊 IFN-Γ基因地高辛

新疆多浪羊IL-1β基因原核表达载体的构建与表达: 2016年; 【目的】构建新疆多浪羊IL-1β基因编码区的原核表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,为进一步研究IL-1β蛋白的结构功能奠定基础。【方法】从含质粒pMD-18T-IL-1β的大肠杆菌DH5α中获取IL-1β基因,与pET-28b质粒DNA连接,构建原核表达载体pET-28b-IL-1β。先将其转化到克隆载体E.coli DH5α感受态细胞中大量拷贝,经菌液PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定后,提取pET-28b-IL-1β质粒转化到表达载体E.coli BL21(DE3)中,再次进行菌液PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定。将阳性单克隆接种于LB液体培养基,以终浓度为1mmol/L IPTG进行诱导,用SDS-PAGE电泳检测IL-1β蛋白的表达及存在形式,通过Western blotting验证表达产物是否为目的蛋白。【结果】成功构建了新疆多浪羊IL-1β基因的原核表达载体pET-28b-IL-1β,该载体经诱导后表达出融合蛋白,分子质量为32.4ku,主要以包涵体的形式表达;经Western blotting检测,带有6×His标签的融合蛋白有很好的反应原性。【结论】成功构建了新疆多浪羊IL-1β基因的原核表达载体pET-28b-IL-1β,其在大肠杆菌BL21(DE3)中经诱导后表达出分子质量约为32.4ku的IL-1β融合蛋白。; 曾国航徐宏伟李莲瑞; 关键词：多浪羊原核表达

棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法: 本发明涉及一种棉酚对新疆多浪羊淋巴细胞IL-18基因表达影响的研究方法，属于生物技术领域。其具体方法和步骤如下：(1)分离和培养淋巴细胞；(2)提取总RNA；(3)合成cDNA；(4)cDNA的纯化；(5)设计引物；(6...; 李莲瑞王娟娟潘伊微贾山岭徐宏伟曾国航李玮; 文献传递

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