曹智勇
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 供职机构：第二军医大学长征医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会科研基金上海市科学技术委员会基础研究重点项目更多>>
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- 脂联素对高糖刺激下内皮祖细胞的作用及其可能的作用机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究脂联素(adiponectin,APN)对高糖刺激下内皮祖细胞(Endothelial Progenitor Cells,EPCs)的作用,并探讨其可能的机制。方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,经含血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子和100 ml/L胎牛血清的M199培养基培养7d,贴壁细胞进行形态学、流式细胞仪测细胞分子标志物(CD34、CD133和KDR)和激光共聚焦倒置显微镜下观察培养细胞摄取ac-LDL和结合UEA-I经何种方法鉴定为EPCs。细胞同步化后,将其随机分为7组:正常糖浓度对照组(5.5 mmol/L)、高渗对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇及其浓度)、高糖(30mmol/L)组及高糖APN干预组(30 mmol/L葡萄糖合并APN,1.25、2.5、5、10μg/ml)。干预48h后,分别采用MTT比色法、Transwell小室检测EPCs的增殖、迁移;以Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒处理细胞,流式细胞仪检测EPCs的凋亡;用荧光探针(DCFH-DA)检测法进行细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测。结果:①经密度梯度离心法分离出的外周血单个核细胞培养7d后,细胞集落增加明显,梭形细胞增多并呈交叉性生长;用激光共聚焦倒置显微镜观察,细胞摄取DiI-acLDL呈红色荧光,摄取FITC-UEA-I呈绿色荧光,摄取DiI-acLDL并结合FITC-UEA-I的细胞呈黄色荧光,流式细胞仪分析结果提示:细胞表达KDR(92.32%)、CD133(10.7%)、CD34(23.3%),证实培养的细胞是正在分化的EPCs。②随着糖浓度的增高,EPCs的增殖能力下降,凋亡、ROS水平增加(P<0.01);当糖浓度为30 mmol/L与50 mmol/L时,两者相比对EPCs的影响无统计学差异。③与正常糖浓度对照组相比,高渗对照组EPCs的增殖、迁移、凋亡和ROS水平无统计学差异。在30 mmol/L葡萄糖条件下,EPCs的数量和迁移功能较正常对照组明显下降,细胞凋亡增多,不同浓度APN干预后能明显提高高糖损伤后EPCs的功能(P<0.05,P<0.01),并随着浓度的增加,EPCs的增殖与迁移能力增高,凋亡、ROS水平下
- 冷冰张鹏任雨笙梁春曹智勇吴宗贵
- 关键词：脂联素葡萄糖
- 水飞蓟素通过抑制心肌细胞凋亡减轻心肌梗死被引量：1
- 2015年
- 目的观察水飞蓟素对心肌梗死小鼠的心肌保护作用及可能机制。方法将60只雄性小鼠随机分为假手术组、急性心肌梗死组、急性心肌梗死+水飞蓟素组和急性心肌梗死+溶剂组,每组15只。造模术后第2天开始给药,持续4周。建模成功4周后进行血流动力学检测和心脏超声检查评价心脏功能,H-E染色评价心肌梗死程度,TUNEL观察细胞凋亡情况并计算凋亡指数,蛋白质印迹法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax和Cleaved Caspase-3的表达。结果与急性心肌梗死组小鼠相比,水飞蓟素可改善急性心肌梗死小鼠心室收缩功能和血流动力学指标,减小心肌梗死面积、减轻梗死区组织病理学改变(P<0.05),降低心肌细胞凋亡指数(P<0.05),增强Bcl-2蛋白表达并减弱Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论水飞蓟素可减轻小鼠心肌梗死,改善心肌梗死小鼠心功能,其机制与减少心肌细胞的凋亡有关。
- 陈佳曹智勇何永辉吴宗贵任雨笙
- 关键词：水飞蓟素血流动力学心肌收缩心肌梗死细胞凋亡
- 利用自体血清培养人外周血内皮祖细胞被引量：3
- 2012年
- 背景:传统方法培养人外周血来源内皮祖细胞操作复杂,费用大,细胞获得率较低。目的:利用自体血清培养人外周血来源内皮祖细胞,并鉴定其功能。方法:采用密度梯度离心法从人外周血分离得到单个核细胞,体外培养分化为内皮祖细胞。按培养基条件不同分为EGM-2MV组、添加自体血清组(M199+体积分数10%自体血清+胰岛素样生长因子)、添加胎牛血清组(M199+体积分数10%胎牛血清+血管内皮细胞生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+胰岛素样生长因子+表皮生长因子)。观察内皮祖细胞增殖、迁移能力;采用细胞形态观察、双荧光染色法及流式细胞仪等技术对培养的内皮祖细胞进行鉴定。结果与结论:培养第7天,EBM-2MV组和添加自体血清组细胞增殖能力和迁移率都优于添加胎牛血清组(P<0.05)。每组细胞经结合Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素双色荧光染色鉴定后双阳性率>80%,免疫细胞化学检测显示每组细胞CD133,CD34和KDR的表达均为阳性。证实在M199培养液中添加自体血清是一种简单、高效的培养内皮祖细胞方法。
- 张鹏任雨笙梁春冷冰曹智勇吴宗贵
- 关键词：内皮祖细胞细胞培养人外周血自体血清干细胞培养干细胞
- 髓系细胞来源酪氨酸磷酸酶Shp2经FAK信号通路参与小鼠动脉粥样硬化进展的作用及其机制研究
- 目的 蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2(Src homology 2 domain-containing protein tyrosine phosphatase 2,Shp2)是机体广泛表达的具有酪氨酸磷酸酶活性的调控蛋白,其...
- 曹智勇王全兴梁春吴宗贵
- 髓系细胞RIG-I在动脉粥样硬化斑块形成中的作用及机制
- 维甲酸诱导基因Ⅰ(Retinoic acid inducible gene-I,RIG-I)是新近发现的重要模式识别受体,目前已被证实能够识别5’端三磷酸基团的RNA及短的双链RNA,在介导天然免疫反应中发挥重要作用,但...
- 张铭健曹智勇陈佳郭猛刘芳任雨笙王全兴曹雪涛
- 关键词：髓系细胞骨髓移植动脉粥样硬化
- 文献传递
