刘家豪
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 环状RNA-circ-VCAN在胶质瘤细胞中功能及作用机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的探索环状RNA-circ-VCAN在胶质瘤中功能及作用机制。方法荧光定量PCR验证环状RNA-circ-VCAN在正常胶质细胞以及胶质瘤细胞中的表达情况;核质分离实验验证circ-VCAN在细胞核质分布情况;RNase R消化线性RNA实验验证circ-VCAN对RNase R消化的抵抗能力;构建敲低环状RNA-circ-VCAN的U373和T98G瞬时转染细胞株;CCK8实验检测敲低环状RNA-circ-VCAN后细胞的增殖能力;Western blot检测NF-κB通路蛋白P-P65表达水平。结果与正常胶质细胞(HA1800)相比,环状RNA-circ-VCAN在胶质瘤细胞(尤其是在U373和T98G)中高表达,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞核质分离实验证明circ-VCAN主要存在细胞质中;circ-VCAN能抵抗RNase R的消化;CCK8实验证明敲低circ-VCAN能抑制U373和T98G的细胞增殖(P<0.05);Westernblot检测敲低circ-VCAN后的U373和T98G细胞显示NF-κB通路蛋白P-P65表达水平减少。结论在胶质瘤细胞中敲低circ-VCAN能减慢胶质瘤细胞的生长,提示circ-VCAN可能成为一个新的治疗靶点。
- 黄佐於谢琳欧阳乐平何明亮刘家豪刘安民
- 关键词：胶质瘤
- MiR-125a-3p通过MAPK信号通路影响胶质瘤细胞的增殖及凋亡的实验研究被引量：6
- 2018年
- 目的 探讨miR-125a-3p对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响及其在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用.方法 (1)比较肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中565例胶质瘤组织和10例正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(2)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2015年4月至2018年4月手术切除并经病理检查证实的胶质瘤标本30例,其中低级别脑胶质瘤7例,高级别胶质瘤23例.另外收集同期因手术入路需要和颅脑外伤切除的正常脑组织标本8例.应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(3)体外培养正常胶质细胞HA1800及人脑胶质瘤细胞U251、U373、U87、U138、T98G,72 h后应用RT-qPCR检测6组细胞miR-125a-3p的表达;(4)取对数生长期的U251、U373细胞,分为无义序列组和miR-125a-3p模拟物组,应用LipofectamineTM 2000分别转染无义序列和miR-125a-3p模拟物.转染后72 h应用RT-qPCR检测2组细胞miR-125a-3p的表达,克隆形成实验检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测2组细胞的凋亡情况,Western blotting检测2组细胞凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达.结果 (1)TCGA数据库中,胶质瘤组织中miR-125a-3p的表达低于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05).(2)临床收集的正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本中miR-125a-3p的表达依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与HA1800细胞比较,U251、U373、U87、U138、T98G细胞中miR-125a-3p的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中U251和U373细胞中miR-125a-3p表达下降得最明显.(4)与无义序列组比较,miR-125a-3p模拟物组U251和U373细胞中miR-125a-3p的表达增加,克隆形成率降低,凋亡率增加,凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-3、cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-7的表达均增加,磷酸化(p)-P38/MAPK蛋白的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125a-3p在脑�
- 谢琳黄佐於欧阳乐平何明亮刘家豪刘安民
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖丝裂原活化蛋白激酶
- 血红素氧化酶Ⅰ型蛋白在胶质瘤中的表达及其临床意义被引量：1
- 2017年
- 目的研究血红索氧化酶Ⅰ型（HO-1）在胶质瘤组织中的表达及意义。方法（1）选择中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2010年1月至2015年1月采用手术治疗的胶质瘤患者56例。其中WHO分级Ⅰ级4例，Ⅱ级16例，Ⅲ级10例，Ⅳ级26例。将Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤分为低级别胶质瘤组，将Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤分为高级别胶质瘤组。免疫组化染色检测胶质瘤中HO-1的表达。（2）采用R语言survival工具包分析癌症基金组图谱（TCGA）数据库中1107例胶质瘤患者的预后与HO-1蛋白表达的关系。结果（1）免疫组化染色结果显示高级别胶质瘤中HO-1高表达率（75％）高于低级别胶质瘤（30％），差异有统计学意义（P〈0．05）。高级别胶质瘤中HO-1的表达水平高于低级别胶质瘤．差异有统计学意（P〈0．05）。用HO-1评分绘制ROC曲线，曲线下面积为0．747（P=0．002），说明HO-1的表达水平对胶质瘤分级的判断有参考价值。Log-rank检验显示HO-1低表达组患者的累积生存率高于HO-1高表达组，差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）TCGA数据库中HO-1低表达组患者的同期生存率高于HO-1高表达组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论胶质瘤中H0-1蛋白表达水平与胶质瘤恶性程度及预后相关，有望作为反映胶质瘤诊断及治疗的新生物学指标，并成为胶质瘤治疗和研究的新靶点。
- 欧阳乐平李凯舒刘家豪何明亮蔡望青邓跃飞刘安民
- 关键词：神经胶质瘤恶性程度预后
- 一期双侧颞叶病灶切除术治疗双侧严重放射性颞叶损伤的临床疗效分析
- 2020年
- 目的探讨一期双侧颞叶病灶切除术治疗鼻咽癌放疗后双侧严重放射性额叶损伤的疗效及安全性。方法中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2013年1月至2017年12月采用一期双侧额叶病灶切除术治疗鼻咽癌放疗后双侧严重放射性颞叶损伤患者12例,回顾性分析患者的临床资料,比较患者术前、术后2周Kamofsky功能状态评分(KPS)变化,记录手术相关并发症和死亡情况,比较患者术前、术后3个月头颅影像学图像以评估额叶病灶变化。结果12例(100%)患者术后KPS评分均得到改善,与术前KPS评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。2例患者术后出现肺部感染,1例患者出现切口愈合不良,1例患者出现颅内感染,对症处理后均康复出院。12例患者术后均无新发神经系统症状。随访期间12例患者术后头颅MRI检査显示病灶被完整切除,脑白质病变减轻或完全消退。结论一期双侧颞叶病灶切除术治疗鼻咽癌放疗后双侧严重放射性颞叶损伤是安全可行的。
- 欧阳乐平刘家豪何明亮谢琳黄佐於刘安民
- 关键词：放射性脑损伤疗效
- 以颞叶囊性变为主的放射性脑病手术方式的探讨
- 2019年
- 目的探讨不同手术方式对以颞叶囊性变为主的放射性脑病的临床治疗效果。方法回顾性分析2010年1月至2016年12月中山大学孙逸仙纪念医院神经外科行手术治疗的56例以颞叶囊性变为主的放射性脑病患者的临床资料。其中,24例采用单纯病灶切除术(对照组);32例采用病灶切除及脑池解剖术(观察组)。根据患者的术后疗效、Karnofsky功能状态评分(KPS)、磁共振成像中病灶体积的大小及随访结果,比较两组患者的临床手术效果及预后。结果对照组中术后主诉症状完全缓解率为29.2%(7/24),观察组为71.9%(23/32),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组术后的KPS为(70.13±19.10)分,观察组为(84.16±13.47)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组术后的病灶体积为(32.35±20.85)cm^3,观察组为(13.31±6.44)cm^3,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者均随访1年,观察组的再次入院率低于对照组,分别为18.7%(6/32)、75.0%(18/24),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对于以颞叶囊性为主的放射性脑病,手术方式除了单纯病灶切除之外,进一步解剖环池、脚间池,防止有占位效应的孤立囊腔形成,可达到更好的治疗效果。
- 黄凯敏谢琳欧阳乐平刘家豪黄佐於何明亮刘安民
- 关键词：颞叶放射性脑病神经外科手术
- PDLIM4基因对胶质瘤预后及胶质瘤细胞放射敏感性的影响被引量：4
- 2017年
- 目的 分析PDLIM4（PDZ and LIM domain 4）基因与胶质瘤预后及放射敏感性的影响.方法 应用生物信息学技术对GSE53733芯片进行分析得出差异性表达基因,并使用免疫印迹法（Western blot）检测PDLIM4蛋白表达,实时荧光定量PCR、siRNA、MTT、流式细胞法检测、X射线照射等方法研究PDLIM4基因对胶质瘤预后及胶质瘤细胞照射敏感的相关性.结果 生物信息学分析结果提示PDLIM4在芯片中表达差异最明显（logFC=1.055897,P〈0.05）.通过40例胶质瘤的qPCR结果证实PDLIM4在高级别与低级别胶质瘤中差异表达（t=4.44,P〈0.05）,并与患者生存时间具有相关性（χ^2=5.52,P〈0.05）,且PDLIM4基因与胶质瘤细胞的放射敏感性相关（t=35.99,P〈0.05）.结论 PDLIM4基因表达水平与胶质瘤恶性程度及预后相关,并参与了细胞的X射线抵抗.
- 罗铭蔡望青李凯舒刘家豪薛卫平
- 关键词：胶质瘤恶性程度预后
- MCM5促进胶质母细胞瘤恶性进展及其机制研究被引量：1
- 2022年
- 目的探究微小染色体维持蛋白5(MCM5)对胶质母细胞瘤的恶性进展促进作用及机制。方法(1)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2020年9月至2021年9月术中切除的3例非肿瘤患者脑组织与3例Ⅳ级胶质母细胞瘤组织进行质谱检测及蛋白质组学定量分析,筛选差异表达的蛋白并进行功能富集分析。(2)在蛋白质组学的基础上筛选出在胶质母细胞瘤中高表达的目标蛋白MCM5,利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库验证其在胶质母细胞瘤中表达情况,并在收集到的临床标本中进行mRNA水平的进一步验证。(3)通过siRNA转染将U251细胞分为阴性对照组、敲低组-1(si-1组)、敲低组-2(si-2组),采用CCK-8实验、平板克隆形成实验、EdU染色、Transwell实验及流式细胞术检测MCM5对胶质母细胞瘤恶性表型的调控作用。(4)利用TCGA数据库中胶质瘤患者的转录组数据,通过GSEA算法探究MCM5调控胶质母细胞瘤恶性进程可能的分子机制。结果(1)在胶质母细胞瘤临床样本中筛选出表达上调的蛋白322种,表达下调的蛋白94种,其中MCM5在3份胶质母细胞瘤样本中均呈现为高表达。(2)基于TCGA数据库163例胶质母细胞瘤和207例非肿瘤脑组织的分析显示MCM5在胶质母细胞瘤中表达上调,差异有统计学意义(t=3.340,P=0.001);针对临床收集的3份胶质母细胞瘤组织和3份非肿瘤脑组织的实时定量PCR(RT-qPCR)实验结果同样显示MCM5在胶质母细胞瘤中表达增高,差异有统计学意义(t=3.876,P<0.001)。(3)与阴性对照组比较,si-1组、si-2组细胞MCM5 mRNA及蛋白表达均显著下降,接种后第5天的增殖率显著降低,细胞克隆数量显著减少,EdU阳性细胞比例显著降低,G1期细胞比例显著上升,迁移能力明显受损,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)GSEA分析结果显示,MCM5高表达组mRNA在DNA损伤修复、E2F靶基因、MYC靶基因、上皮-间质转化(EMT)、白细胞介素6-Janus激酶-信号转导与
- 冯如玥谢琳欧阳乐平何明亮刘家豪刘安民
- 关键词：微小染色体维持蛋白5胶质母细胞瘤细胞增殖细胞周期
